asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
190 Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> u <strong>humanoj</strong> <strong>reprodukciji</strong><br />
tokom spermatogenetskog sazrevanja. Ovo<br />
je demonstrirano bliskom korelacijom<br />
izme|u koncentracije kreatin kinaze ili<br />
odnosa HspA2 - heat shock 70kDa protein<br />
2 recombinantnog proteina i gustine enzima<br />
plazme spermatozoida β1,2 -galaktosiltransferaze<br />
kod spermatozoida razli~ite<br />
zrelosti. Ovaj nalaz obja{njava dve va`ne<br />
karakteristike nezrelih spermatozoida:<br />
zadr`avanje citoplazme i deficijenciju u<br />
vezivanju sa zonom pelucidom. Izbacivanje<br />
HspA2 - heat shock 70kDa protein<br />
2 proteina se odvija istovremeno sa kretanjem<br />
spermatozoidnih proteina, koji je u<br />
osnovi istiskivanja citoplazme i remodeliranja<br />
plazma membrane spermatozoida.<br />
Ovo omogu}ava vezivanje spermatozoida<br />
za zonu pelucidu.<br />
Sinteza Hsp70 - 2 - heat shock 70kDa<br />
protein 2 familije proteina reguli{e se u<br />
toku razvoja i Hsp70-2 - heat shock 70kDa<br />
protein 2 se pojavljuje tokom profaze<br />
mejoze. Protein Hsp70 -2 - heat shock<br />
70kDa protein 2 koji osloba|a testis, prvo<br />
se sinteti{e kod pahitenskih spermatocita<br />
tokom mejotske faze spermatogeneze i<br />
istrajava u spermatidima i zrelim spermatozoidima.<br />
Funkcije Hsp70 - 2 - heat shock<br />
70kDa protein 2 su odr`avanje sinaptonemalnih<br />
kompleksa i pomaganje kreatanju<br />
hromozoma tokom mejoze i razvoja spermatocita.<br />
Prema tome, ciljano inaktivacija<br />
Hsp70 -2 - heat shock 70kDa protein 2 gena<br />
izaziva zastoj sazrevanja spermatozoida i<br />
azospermiju, {to mo`e biti povezano sa<br />
lo{om mejotskom rekombinacijom spermatocita,<br />
reme}enjem regulatornog mehanizma<br />
}elijskog ciklusa mejoze, ili sa direktnom<br />
degradacijom apoptoti~kog mehanizma<br />
spermatocita, ili ~ak spermatida, ili<br />
ejakuliranih nezrelih spermatozoida.<br />
Veza izme|u nezrelosti spermatozoida<br />
i hromozomskih aneuploidija je od posebnog<br />
zna~aja. Frekvencija hromozomskih aneuploidnosti<br />
je ve}a kod nezrelih spermatozoida<br />
u odnosu na zrele. Ra|ene su korelacione<br />
analize o zavisnosti izme|u udela<br />
nezrelih spermatozoida i zadr`avanja citoplazme<br />
i frekvencije ukupnih dizomija,<br />
diploidije i ukupnih dizomija i diploidije.<br />
Me|u raznim dizomijama je dizomija Y<br />
hromozoma u najboljoj korelaciji sa incidencijom<br />
nezrelih spermatozoida. Treba<br />
posebno izdvojiti rezultate studija koje su<br />
utvrdile da nije bilo nikakve korelacije<br />
izme|u nezrelih spermatozoida i incidencije<br />
diploidije, sto zna~i da pojava diploidnosti<br />
nije u vezi sa nezrelo{}u spermatozoida.<br />
Relativne efikasnosti gustinskog gradijenta<br />
i swim-up metode pri eliminisanju<br />
aneuploidnih i diploidnih spermatozoida su<br />
potvr|ene u mnogobrojnim istra`ivanjima.<br />
Nezreli spermatozoidi imaju manju gustinu<br />
zbog zadr`ane citoplazme, u pore|enju sa<br />
zrelim spermatozoidima koji se sastoje od<br />
nukleusa, akrozoma, strukture repa i plazma<br />
membrane. Zbog ovog razloga se zreli<br />
spermatozoidi, bez citoplazme, talo`e na<br />
dnu gustinskih gradijenata, dok se nezreli<br />
spermatozoidi zadr`avaju u gornjem delu,<br />
bilo na vrhu faze gradijenata, ili u slu~aju<br />
multifaznih gradijenata, u me|uprostoru<br />
izme|u razli~itih faza gradijenta.<br />
Gradijent se sastoji od koloidnih ~estica<br />
SiO2 stabilisanih kovalentno povezanim<br />
hidrofilnim koloidalnim ~esticama silana<br />
SiH4. Rastvor sadr`i EDTA - ethylenediaminetetraacetic<br />
acid i glukozu. Gradijent<br />
se naj~e{}e formira postepeno u slojevima<br />
rastvora od 90%, 70% i 40% u cilju selektiranja<br />
odre|enih pre~nika }elija.<br />
Prvi sloj }e zadr`ati epitelne }elije i<br />
krvne }elije.<br />
Sloj sa koncentracijom od 70% }e odvojiti<br />
nezrele spermatozoide, okrugle spermatide kao<br />
i one sa abnormalno oblikovanim glavama.
Change language