asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
196 Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> u <strong>humanoj</strong> <strong>reprodukciji</strong><br />
Modifikacije ove tehnike su smek{avanje,<br />
maceracija pomo}u mikro-mlinova,<br />
enzimski tretman ili tretiranje uzorka<br />
eritrocitnim lizing puferom - lysing buffer.<br />
Izme|u ove dve metode nema razlike {to se<br />
ti~e procenta oplodnje, razvoja embriona i<br />
implantacije.<br />
Uzorci sperme, tako|e, mogu biti dobijeni<br />
filtriranjem kroz filter od 40µm radi<br />
uklanjanja }elijskih i tubularnih ostataka. U<br />
nekim embriolo{kim laboratorijama se razmotavanje<br />
pojedina~nih tubula posti`e forcepsom<br />
i kompresovanjem fragmenata<br />
tubula, po~ev od srednjeg dela ka krajevima.<br />
Uzorci testikularne sperme mogu dalje<br />
biti obra|ivani jednostavnim ispiranjem u<br />
medijumu ili neprekidnom centrifugom<br />
radi uklanjanja ostataka i dobijanja suspenzije<br />
testikularnih spermatozoida. Radi<br />
za{tite spermatozoida od potencijalne {tete<br />
uticaja ROS - reactive oxygen species-a,<br />
duplira se koncentracija serumskog albumina<br />
ili ceo serum za vreme pripreme spermatozoida.<br />
Ve}e koncentracije proteina ili<br />
seruma, tako|e, smanjuju mogu}nost prijanjanja<br />
spermatozoida za ICSI - intra citoplasmatic<br />
sperm injection iglu tokom rada.<br />
Pribli`no polovina testikularnih spermatozoida<br />
ne pokazuje pokretljivost u<br />
vreme pripreme, ali se i nepokretni spermatozoidi<br />
mogu upotrebiti za ICSI - intra citoplasmatic<br />
sperm injection po{to imaju isti<br />
potencijal za oplodnju kao i pokretni spermatozoidi,<br />
posle pribli`no 4 sata kultivacije.<br />
Kada se testikualarni uzorak stavi u kulturu,<br />
udeo pokretnih spermatozoida je<br />
obi~no najve}i, 91% posle 24 ~asa od<br />
inkubacije.<br />
Zbog toga se biopsija zakazuje jedan<br />
dan pre punkcije i dobijanja jajnih }elija.<br />
ICSI - intra citoplasmatic sperm injection<br />
sa testikularnim spermatozoidima je sli~na<br />
sa ICSI - intra citoplasmatic sperm injection<br />
sa ejakuliranim spematozoidima. Posle izdvajanja<br />
morfolo{ki normalih i pokretnih<br />
spermatozoida spermatozoidi se imobili{u<br />
u PVP - polyvinyl pyrrolidone i ubacuju se<br />
u oocit. Iako su kondenzacija hromatina i<br />
nuklearno sazrevanje nedovr{eni kod<br />
testikularnih spermatozoida, rezultat oplodnje<br />
sa testikularnim spermatozoidima je<br />
sli~an ishodu ICSI - intra citoplasmatic<br />
sperm injection sa ejakularnim spermatozoidima.<br />
TESE - testicular sperm extraction u<br />
kombinaciji sa ICSI - intra citoplasmatic<br />
sperm injection je metod izbora u slu~ajevima<br />
mu{ke neplodnosti sa opstruktivnom<br />
ili neopstruktivnom azoospermijom.<br />
Procenat dobijanja spermatozoida kod<br />
mu{karaca sa neopstruktivnom azoospermijom<br />
se kre}e od 40% do 70%. Postoji<br />
direktna korelacija izme|u mogu}nosti<br />
dobijanja testikularnih spermatozoida i<br />
histopatologije testisa. U pore|enju sa sindromom<br />
samo Sertolijevih }elija, Sertoly<br />
cell syndrom, {anse za uspe{no nala`enje<br />
spermatozoida su bile 44,3 puta ve}e kod<br />
slu~ajeva ozbiljne hipospermatogeneze i<br />
8,4 puta ve}e kod mu{karaca sa zastojem<br />
sazrevanja. Mogu}nost dobijanja spermatozoida<br />
kod azoospermi~nih pacijenata je u<br />
direktnoj vezi sa etiologijom poreme}aja.<br />
Kada je testikularna histologija normalna,<br />
kao kod mu{karaca sa opstruktivnom<br />
azoospermijom ili hipoplazijom germinativnih<br />
}elija, dobijanje spermatozoida je<br />
skoro uvek uspe{no. Kod mu{karaca sa<br />
aplazijom germinativnih }elija ili zastojem<br />
u spermatogenezi, rezultat je nepredvidljiv<br />
i promenljiv. [to se ti~e mu{karaca sa<br />
neopstruktivnom i opstruktivnom azoospermijom,<br />
podaci koji se odnose na kvalitet<br />
i kvantitet spermatozoida su kontraverzni.<br />
Nekoliko izve{taja opisuje zna~ajno smanjenje<br />
uspe{nih oplodnji i trudno}a u