03.12.2012 Views

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

asistirana reproduktivna tehnologija u humanoj reprodukciji

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

196 Asistirana <strong>reproduktivna</strong> <strong>tehnologija</strong> u <strong>humanoj</strong> <strong>reprodukciji</strong><br />

Modifikacije ove tehnike su smek{avanje,<br />

maceracija pomo}u mikro-mlinova,<br />

enzimski tretman ili tretiranje uzorka<br />

eritrocitnim lizing puferom - lysing buffer.<br />

Izme|u ove dve metode nema razlike {to se<br />

ti~e procenta oplodnje, razvoja embriona i<br />

implantacije.<br />

Uzorci sperme, tako|e, mogu biti dobijeni<br />

filtriranjem kroz filter od 40µm radi<br />

uklanjanja }elijskih i tubularnih ostataka. U<br />

nekim embriolo{kim laboratorijama se razmotavanje<br />

pojedina~nih tubula posti`e forcepsom<br />

i kompresovanjem fragmenata<br />

tubula, po~ev od srednjeg dela ka krajevima.<br />

Uzorci testikularne sperme mogu dalje<br />

biti obra|ivani jednostavnim ispiranjem u<br />

medijumu ili neprekidnom centrifugom<br />

radi uklanjanja ostataka i dobijanja suspenzije<br />

testikularnih spermatozoida. Radi<br />

za{tite spermatozoida od potencijalne {tete<br />

uticaja ROS - reactive oxygen species-a,<br />

duplira se koncentracija serumskog albumina<br />

ili ceo serum za vreme pripreme spermatozoida.<br />

Ve}e koncentracije proteina ili<br />

seruma, tako|e, smanjuju mogu}nost prijanjanja<br />

spermatozoida za ICSI - intra citoplasmatic<br />

sperm injection iglu tokom rada.<br />

Pribli`no polovina testikularnih spermatozoida<br />

ne pokazuje pokretljivost u<br />

vreme pripreme, ali se i nepokretni spermatozoidi<br />

mogu upotrebiti za ICSI - intra citoplasmatic<br />

sperm injection po{to imaju isti<br />

potencijal za oplodnju kao i pokretni spermatozoidi,<br />

posle pribli`no 4 sata kultivacije.<br />

Kada se testikualarni uzorak stavi u kulturu,<br />

udeo pokretnih spermatozoida je<br />

obi~no najve}i, 91% posle 24 ~asa od<br />

inkubacije.<br />

Zbog toga se biopsija zakazuje jedan<br />

dan pre punkcije i dobijanja jajnih }elija.<br />

ICSI - intra citoplasmatic sperm injection<br />

sa testikularnim spermatozoidima je sli~na<br />

sa ICSI - intra citoplasmatic sperm injection<br />

sa ejakuliranim spematozoidima. Posle izdvajanja<br />

morfolo{ki normalih i pokretnih<br />

spermatozoida spermatozoidi se imobili{u<br />

u PVP - polyvinyl pyrrolidone i ubacuju se<br />

u oocit. Iako su kondenzacija hromatina i<br />

nuklearno sazrevanje nedovr{eni kod<br />

testikularnih spermatozoida, rezultat oplodnje<br />

sa testikularnim spermatozoidima je<br />

sli~an ishodu ICSI - intra citoplasmatic<br />

sperm injection sa ejakularnim spermatozoidima.<br />

TESE - testicular sperm extraction u<br />

kombinaciji sa ICSI - intra citoplasmatic<br />

sperm injection je metod izbora u slu~ajevima<br />

mu{ke neplodnosti sa opstruktivnom<br />

ili neopstruktivnom azoospermijom.<br />

Procenat dobijanja spermatozoida kod<br />

mu{karaca sa neopstruktivnom azoospermijom<br />

se kre}e od 40% do 70%. Postoji<br />

direktna korelacija izme|u mogu}nosti<br />

dobijanja testikularnih spermatozoida i<br />

histopatologije testisa. U pore|enju sa sindromom<br />

samo Sertolijevih }elija, Sertoly<br />

cell syndrom, {anse za uspe{no nala`enje<br />

spermatozoida su bile 44,3 puta ve}e kod<br />

slu~ajeva ozbiljne hipospermatogeneze i<br />

8,4 puta ve}e kod mu{karaca sa zastojem<br />

sazrevanja. Mogu}nost dobijanja spermatozoida<br />

kod azoospermi~nih pacijenata je u<br />

direktnoj vezi sa etiologijom poreme}aja.<br />

Kada je testikularna histologija normalna,<br />

kao kod mu{karaca sa opstruktivnom<br />

azoospermijom ili hipoplazijom germinativnih<br />

}elija, dobijanje spermatozoida je<br />

skoro uvek uspe{no. Kod mu{karaca sa<br />

aplazijom germinativnih }elija ili zastojem<br />

u spermatogenezi, rezultat je nepredvidljiv<br />

i promenljiv. [to se ti~e mu{karaca sa<br />

neopstruktivnom i opstruktivnom azoospermijom,<br />

podaci koji se odnose na kvalitet<br />

i kvantitet spermatozoida su kontraverzni.<br />

Nekoliko izve{taja opisuje zna~ajno smanjenje<br />

uspe{nih oplodnji i trudno}a u

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!