Periodoncia.Eley.6a.Ed

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proteínas del huésped. A continuación, desarrollaron una vacuna mediante conjugación
del complejo RgpA-Kgp, ABM sintético y péptidos de la zona activa
de la proteinasa conjugada con toxoide de difteria. Esta vacuna protegía frente
a la pérdida de hueso periodontal inducida por P. gingivalis. Se observó que el
péptido y las vacunas proteicas más eficaces producían una respuesta elevada
de anticuerpos IgG1. Además, los ratones vacunados tenían una respuesta con
predominio de la IL-4 específica contra P. gingivalis, mientras que los ratones
con enfermedad tenían una respuesta predominante de IFN. Los anticuerpos
péptido específicos dirigidos contra la secuencia ABM2 protegieron frente a la
pérdida de hueso periodontal e inhibieron la unión del complejo RgpA-Kgp a
fibrinógeno, fibronectina y a colágeno tipo V. Además, los anticuerpos péptido
específicos dirigidos contra la secuencia ABM3 protegieron frente a la pérdida
de hueso periodontal e inhibieron la unión a la hemoglobina. Sin embargo, la
mayoría de los anticuerpos de protección estaban dirigidos contra las zonas
activas de las proteinasas RgpA y Kgp. Los resultados sugieren que cuando se
utiliza el complejo RgpA-Kgp, o el sitio de unión funcional o péptidos de la
zona activa, como vacuna se induce una respuesta Th2 que bloquea la función
del complejo RgpA-Kgp y protege frente a la pérdida de hueso periodontal.
La proteína de la membrana externa con un peso molecular de 53 kDa
(Ag53) aislada en P. gingivalis produce una fuerte respuesta inmunitaria
humoral en muchos pacientes con periodontitis. A este respecto, Kato et al.
(2005) demostraron que sólo las estirpes de células Th con un cociente Th2/
Th1 alto inducían la producción de IgG específica contra Ag53, cuando se
cultivaron junto con leucocitos con depleción de células T. Estos autores
consideraron que la diferencia en el equilibrio Th2/Th1 podría regular la
producción de IgG específica contra Ag53.
Se ha observado que la inmunización sucesiva de ratones con F. nucleatum y
P. gingivalis modula las respuestas de IgG sérica específica contra estos organismos.
Esto se investigó examinando las subclases de IgG (Gemmell et al.,
2004a). Se observó una respuesta Th1/Th2 sistémica en ratones inmunizados
con P. gingivalis y/o F. nucleatum, con una tendencia hacia una respuesta Th2
en ratones inmunizados con P. gingivalis, y un aumento significativo de la respuesta
de IgG2a (Th1) anti P. gingivalis en ratones inmunizados con F. nucleatum
antes de inmunizarlos con P. gingivalis. Además, la inhibición de la
fagocitosis mediada por neutrófilos de células de P. gingivalis opsonizadas con
suero inmunitario fue modulada por la presencia de anticuerpos anti F. nucleatum,
mientras que los anticuerpos anti P. gingivalis indujeron un efecto inhibidor
de la respuesta fagocítica frente a F. nucleatum. Por tanto, el tipo de respuesta
inmunitaria se ve regulada por la secuencia de exposición a estas bacterias.
Califano et al. (2004) han demostrado que los pacientes con formas agresivas
de periodontitis que eran seropositivos para P. gingivalis tenían menos
pérdida de inserción que los que eran seronegativos para esta bacteria, lo que
sugiere que el anticuerpo reactivo contra los antígenos de P. gingivalis puede
tener un efecto protector y disminuir la gravedad y la extensión de la enfermedad.
Además, estudios con modelos de abscesos en ratones y sobre la
respuesta de anticuerpos del huésped en pacientes con periodontitis crónica
sugieren que los anticuerpos reactivos contra la hemaglutinina de P. gingivalis
pueden constituir una respuesta humoral protectora importante. Por tanto,
estos autores investigaron la relación entre el anticuerpo reactivo contra la
hemaglutinina de P. gingivalis y la pérdida de inserción periodontal. La IgG
reactiva contra la hemaglutinina de P. gingivalis se halló tanto en pacientes
con periodontitis crónica como con periodontitis agresiva generalizada, y en
su mayoría de subclase IgG1 e IgG3. Sin embargo, no se observó que el anticuerpo
reactivo contra la hemaglutinina de P. gingivalis tuviera una relación
significativa con la pérdida de inserción periodontal.
Yonezawa et al. (2005) habían demostrado antes que una vacuna de ADN
del gen rgpA de P. gingivalis producía respuestas inmunitarias protectoras
contra la infección por P. gingivalis en ratones. Estos autores han demostrado
que se produce una reducción de la mortalidad (por la infección con dosis
letales de P. gingivalis) en ratones inmunizados con la vacuna de ADN de
rgpA. También se han evaluado los valores de citocinas en el modelo de ratón
con dosis no letales de infección por P. gingivalis para analizar el mecanismo
de protección mediante la inmunización con la vacuna de ADN de rgpA.
Después del contacto no letal con P. gingivalis W50, aumentó la producción
de IL-2, 4, 5 y 12. Sin embargo, se observó que el valor de interferón (IFN)
era menor en el suero de los ratones inmunizados con la vacuna de ADN que
en el suero de los no inmunizados. La regulación de la producción de IFN
causada por la inmunización con la vacuna de ADN de rgpA puede tener una
función importante en la protección contra la infección por P. gingivalis en
ratones, y promete tener una respuesta similar en los seres humanos.
Koizumi et al. (2008) investigaron recientemente la expresión global de los
genes de las células ST2 de la estroma de ratón infectadas con el patógeno
periodontal P. gingivalis utilizando tecnología de microarrays y observaron
que esta bacteria producía una amplia expresión de genes proinflamatorios.
Las células ST2 y los osteoblastos de la calota extraídos de ratones C3H/HeN,
C57BL/6 y de ratones con deficiencia de MyD88 (MyD88-/-) se infectaron con
P. gingivalis ATCC33277 y su mutante KDP136 (deficiente en gingipaína).
Estos autores observaron que varias respuestas proinflamatorias de las
células estroma/osteoblásticas infectadas con P. gingivalis dependen del
NF-ab, pero que no siempre dependen de la vía del receptor tipo toll/MyD88,
mientras que algunas respuestas están relacionadas con la activación de los
receptores activados por proteasas. Por tanto, P. gingivalis no utiliza plenamente
las moléculas de reconocimiento de patógenos claramente establecidas
como los receptores tipo toll (TLR).
En un estudio realizado en ratones, Lee et al. (2006) demostraron que la
proteína de choque térmico 60 (HSP60, heat shock protein 60) de P. gingivalis
podía utilizarse como vacuna, y demostraron que inhibía la pérdida de hueso
alveolar inducida por múltiples bacterias (v. cap. 11 para más detalles).
La etiología infecciosa de la periodontitis es compleja y no existe ninguna
modalidad de tratamiento curativa (Persson, 2005). Los estudios en primates
no humanos que utilizan periodontitis experimentales producidas por ligaduras
sugieren que las respuestas de anticuerpos a la inmunización activa contra
P. gingivalis pueden inducirse, potenciarse y obtenerse a lo largo del tiempo y
de forma segura. En diferentes modelos animales se han evaluado las respuestas
inmunitarias contra células bacterianas enteras y contra proteínas purificadas,
y se ha demostrado que varias preparaciones pueden considerarse buenas
candidatas a vacunas. Los datos sugieren que la inmunización reduce la velocidad
y la gravedad de la pérdida ósea. Temporalmente también puede modificarse
la composición de la microflora subgingival. La inmunización activa
natural que tiene lugar tras las intervenciones terapéuticas provoca un aumento
de los valores de anticuerpos y mejora potencialmente los resultados del tratamiento.
La inmunización pasiva de los seres humanos con anticuerpos
monoclonales contra P. gingivalis impide temporalmente la colonización de
P. gingivalis. El tratamiento probiótico puede ser un método alternativo.
Además deben considerarse los temas de regulación y de seguridad cuando se
realicen estudios con vacunas periodontales en humanos. La etiología infecciosa
compartida entre las periodontitis y las enfermedades sistémicas puede
potenciar el desarrollo de las vacunas. También debe analizarse el impacto de
la inmunización natural y de la inmunización pasiva en humanos que, por el
momento, puede ser más viable que los estudios de inmunización activa.
Koizumi et al. (2008) habían afirmado antes que la inmunoglobulina G
específica (IgG) producida tras la inmunización transcutánea (ITC) con una
proteína de la membrana externa (OMP, outer membrane protein) de 40 kDa
(40k-OMP) de P. gingivalis, conjugada con la toxina del cólera (TC) como
adyuvante, inhibía la coagregación de P. gingivalis. En este estudio analizaron
el potencial de la 40k-OMP como vacuna transcutánea.
La ITC de los ratones a los que se administró la 40k-OMP causó una
importante producción sérica de IgG e IgA específicas contra 40k-OMP, además
de anticuerpos IgG salivales. Es importante señalar que estas respuestas
humorales fueron provocadas sin adyuvante. Por tanto, los valores de anticuerpos
en suero y en saliva producidos por la ITC con la 40k-OMP sola
fueron idénticos a los producidos por la 40k-OMP más la toxina del cólera
como adyuvante. Las respuestas de anticuerpos séricos producidas por la
40k-OMP persistieron durante más de 140 días. Por otro lado, los anticuerpos
salivales IgG anti-40k-OMP disminuyeron gradualmente. El análisis de las
células formadoras de anticuerpos (CFA) confirmó los valores de anticuerpos
mediante la detección de un elevado número de CFA de IgG específicas contra
40k-OMP en el bazo y en los ganglios linfáticos cervicales. Dado que la
IgG específica contra 40k-OMP inhibía la coagregación de P. gingivalis con
Streptococcus gordonii y la actividad de la hemaglutinina de P. gingivalis, se