UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA Departamento de ...
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III. Extracción y Caracterización –Materiales y Métodos<br />
preparadas a 1000 ppm. El quemador utilizado para Ca 2+ y<br />
Mg 2+ fue <strong>de</strong> óxido nitroso-acetileno y para el Na + y K + <strong>de</strong><br />
aire-acetileno. Las longitu<strong>de</strong>s <strong>de</strong> onda usadas fueron: Ca 2+<br />
a 422,7 nm, K + a 404,4 nm, Na + a 330,2 nm y Mg 2+ 202,6 nm.<br />
3.1.2.3. Composición <strong>de</strong> azúcares y peso molecular<br />
74<br />
La composición <strong>de</strong> azúcares se <strong>de</strong>terminó por HPLC<br />
(Beckman Mo<strong>de</strong>lo 110B) sólo en el mucílago ESC<br />
hidrolizado. Se usó una columna Waters <strong>de</strong> 60 ºA, con un<br />
diámetro <strong>de</strong> 4 µm, empacada con aminopropilsalicilato<br />
unido a sílica amorfa. Como fase móvil se utilizó acetronitrilo-<br />
agua a 25ºC. Con el HLPC se usó un <strong>de</strong>tector <strong>de</strong> índice <strong>de</strong><br />
refracción (Perkin-Elmer, mo<strong>de</strong>lo LC-30) y un integrador<br />
(Varian Mo<strong>de</strong>lo 4400). Una muestra <strong>de</strong> 10 mg <strong>de</strong> mucílago<br />
en polvo seco fue hidrolizada con ácido sulfúrico 1 M (2 ml)<br />
a 80ºC durante 24 h y se enfrió a temperatura ambiente<br />
para su análisis. Los resultados se compararon con los<br />
siguientes estándares: L-arabinosa, L(+)-ramnosa<br />
monohidratada, D-galactosa y D-xilosa, todos ellos <strong>de</strong><br />
grado reactivo (Medina-Torres et al., 2000).<br />
El peso molecular <strong>de</strong>l mucílago escaldado fue<br />
estimado por HPLC (Perkin-Elmer Mo<strong>de</strong>lo 250), equipado<br />
con una columna G 2000 SW (TSK-GEL), un <strong>de</strong>tector <strong>de</strong><br />
índice <strong>de</strong> refracción, IR (Perkin-Elmer series 200) y un<br />
integrador (Spectra-Physics, mo<strong>de</strong>lo SP4270). Se usó una