UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA Departamento de ...
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III. Extracción y Caracterización –Materiales y Métodos<br />
76<br />
Pectinas totales (PT): Se añadieron 2 ml <strong>de</strong> ácido<br />
sulfúrico concentrado a 5 mg <strong>de</strong> mucílago seco con<br />
agitación suave con posterior adición, gota a gota <strong>de</strong> 0,5<br />
ml <strong>de</strong> agua <strong>de</strong>stilada. Se agitó durante 10 min, se filtró y el<br />
filtrado se colocó en un aforado <strong>de</strong> 25 ml, utilizando agua<br />
<strong>de</strong>stilada para el aforo. Se <strong>de</strong>jó reposar 24 h para su<br />
medición. En caso necesario se filtró nuevamente.<br />
Pectinas no extraíbles (PNE): Se obtuvieron por<br />
diferencia <strong>de</strong> PT-PSA-POS.<br />
El contenido <strong>de</strong> ácido galacturónico (AGU) en las<br />
diferentes fracciones pécticas fue <strong>de</strong>terminado mediante el<br />
método espectrofotometrico <strong>de</strong> <strong>de</strong>terminación cuantitativa<br />
<strong>de</strong> ácidos urónicos propuesto por Kintner y Van Buren<br />
(1982), el cual se basa en la reacción <strong>de</strong> AGU con el<br />
reactivo cromóforo m-hidroxidifenil para dar un compuesto<br />
coloreado, que tiene un máximo <strong>de</strong> absorbancia en la<br />
longitud <strong>de</strong> onda correspondiente a 520 nm.<br />
3.1.2.5. Polifenoles totales y actividad antioxidante<br />
La extracción <strong>de</strong> polifenoles <strong>de</strong> los mucílagos se<br />
realizó con metanol al 80% en HCl 6N, en una relación <strong>de</strong> 1<br />
g con 10 ml <strong>de</strong> solución. Se hicieron las diluciones con agua<br />
Milli-Q (Pastrana-Bonilla et al., 2003). La <strong>de</strong>terminación se<br />
hizo colorimétricamente usando el reactivo Folin-Ciocalteau<br />
y ácido gálico como estándar (Re et al., 1999). La