2º Congreso Argentino De Fitopatología Libro de Resúmenes

2 º Congreso Argentino de Fitopatología
DETECCIÓN MOLECULAR DE LOS AGENTES CAUSALES
DE ROYA EN CAÑA DE AZÚCAR
R. Bertani 1 , F. Perera 2 , C. Funes 1 , C. Kairuz 1 , M. Arias 2 , V. González 1 , D.
Ploper 1,3 y A. Castagnaro 2,3 . 1 Fitopatología, 2 Biotecnología, 3 CONICET. EE
Agroindustrial Obispo Colombres (EEAOC), Av. W. Cross 3150. Las Talitas,
Tucumán, Argentina. claudiafunes@eeaoc.org.ar
La roya marrón (Puccinia melanocephala), presente en Tucumán
desde 1988, y la roya naranja (P. kuehnii), aún no reportada en
Argentina, ocasionan pérdidas en el rendimiento de la caña de azúcar.
Dado que la observación visual a campo dificulta la diferenciación de
ambas patologías, y siendo la roya naranja una amenaza potencial
para la agroindustria cañera, es imprescindible disponer de técnicas
de diagnóstico específicas. El objetivo del trabajo fue optimizar
una metodología molecular (PCR) para el diagnóstico de ambos
patógenos. Se colectaron 30 muestras de hojas jóvenes con síntomas
de roya, se les realizó la extracción de ácidos nucleicos con la técnica
de CTAB modificada, con y sin limpieza adicional con fenol. Para la
amplificación de diferentes fragmentos del ADN ribosomal se utilizaron
cinco pares de cebadores: dos generales para hongos (ITS1F/
ITS4, NL1/NL4); uno para diferenciar ambos patógenos (PkPmF/
PkPmR); uno específico para P. melanocephala (Pm1F/Pm1R) y otro
para P. kuehnii (PkPmF/Pk1R). El producto de PCR fue purificado y
secuenciado, comparando las secuencias con las disponibles en el
GenBank. Las muestras resultaron positivas para P. melanocephala,
amplificando fragmentos de 670 pb (ITS1F/ITS4), 608 pb (NL1/NL4),
585 pb (PkPmF/PkPmR) y 480 pb (Pm1F/Pm1R). No se observó la
banda del tamaño esperado de 527 pb al utilizar el par específico para
P. kuehnii. La EEAOC pone a disposición esta metodología para el
diagnóstico de ambos patógenos.
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