2º Congreso Argentino De Fitopatología Libro de Resúmenes

2 º Congreso Argentino de Fitopatología
DIAGNÓSTICO Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE
Peanut Mottle Virus EN EL CULTIVO DE MANÍ
S. de Breuil 1,2 , F. Giolitti 1 , N. Bejerman 1 y S. Lenardon 1,3 . 1 INTA-IFFIVE,
Cno 60 Cuadras, Km 5,5 (5119) Córdoba, 2 Investigador del CONICET, 3
FAV-UNRC, 5800 Río Cuarto, Córdoba. sdebreuil@iffive.inta.gov.ar
Peanut Mottle Virus (PeMoV) fue identificado por microscopía
electrónica y serología como el agente causal del moteado del maní.
Esta virosis es la más prevalente en el cultivo y está presente en las
principales regiones maniseras del país. El objetivo de este trabajo
fue desarrollar una técnica molecular para diagnosticar la virosis y
caracterizar parcialmente un aislamiento de PeMoV. Se realizaron
extracciones de RNA total a partir de plantas infectadas y sanas con
tampón CTAB 2%, que se utilizó como templado en pruebas de RT-
PCR donde se probaron diferentes condiciones de ciclado y un juego
de cebadores específicos diseñados para el gen de la cápside proteica
(CP) del virus: CP-PeMoV(Fw): 5’ACAATGATGAAGTTCGTTACC3’ y
CP-PeMoV(Rv): 5’GCCAACACACGATAAACATAA3’. Los parámetros
de ciclado seleccionados fueron: 48ºC por 1 h, 94ºC por 4 min (40 ciclos
de 94ºC por 30 s, 50ºC por 1 min, 68ºC por 2 min) y una extensión
final de 68ºC por 7 min. Los productos de PCR fueron visualizados en
gel de agarosa y se corroboró la presencia de una banda de ~ 980 pb,
sólo en las plantas infectadas. El cDNA fue clonado y secuenciado;
la secuencia presentó un alto porcentaje de identidad con otros
aislamientos de PeMoV tanto a nivel de nucleótidos (94.3% a 97.5%)
como de aminoácidos (96.4% a 98.6%). La secuenciación del gen de
la CP confirma la identidad del agente causal del moteado del maní.
Además, se dispone de una técnica de diagnóstico molecular para la
identificación del PeMoV.
Financiamiento: PE INTA AEPV-214012.
150