2º Congreso Argentino De Fitopatología Libro de Resúmenes

AJUSTE DE LA MICROSCOPIA CONFOCAL LÁSER
ESCANER PARA EVALUAR EL TROPISMO DEL Mal de Río
Cuarto virus EN SU VECTOR Delphacodes kuscheli
A. Dumón y G. Truol. IFFIVE-INTA, Camino 60 cuadras Km. 5 ½. Córdoba.
Argentina. analiadumon@yahoo.com.ar
Se ha visto que las ninfas de estadio I de D. kuscheli son más
eficientes transmisoras del Mal de Río Cuarto virus (MRCV) que las
de estadio III. La distribución temporal y tisular del virus durante la
infección de las chicharritas es aún desconocida en esos estadios. Al
respecto, se ha propuesto a la Inmuno Microscopía Confocal Láser
Escaner (iCLSM) como una herramienta para el estudio del tropismo
del virus en el vector. En los primeros ensayos realizados con esta
técnica se evidenció una alta autofluorescencia en los órganos del
insecto (intestino y glándulas salivales), por lo que se debieron realizar
ajustes. El objetivo de este trabajo fue poner a punto la técnica de
iCLSM para eliminar la autofluorescencia de los tejidos del insecto
y poder así estudiar la translocación del MRCV hacia las glándulas
salivales. Para esto, se procedió según una adaptación de un protocolo
a los fines de atenuar la autofluorescencia presente en los tejidos
del vector. Se realizaron lavados de los órganos con una solución
alcohólica de H 2 O 2 por una semana y media. En este material se
registró inmunomarcación en glándulas salivales y se logró disminuir
la autofluorescencia, obteniéndose así una mayor resolución. Estos
ensayos permitirán estudiar si las diferencias de transmisión entre
ninfas de estadio I y III se deben a diferencias en la distribución tisular
del virus por la posible existencia de barreras morfológicas.
Financiamiento: FONCyT, PICT 2006 Nº 0358; AEPV 214012
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