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Medizinische Physik 3: Medizinische Laserphysik [2004]

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148 C. Cremer<br />

8.2.5 Experimentelle Kalibrierungsmessungen<br />

Als Basis für die Anwendung der CLSFM in der Genomforschung sowie für<br />

die verbesserte Interpretation konfokaler Ergebnisse wurden eine Reihe von<br />

Kalibrierungsmessungen durchgeführt. Soweit nicht anders spezifiert, wurden<br />

alle hier genannten Messungen mit einem Zweikanal-Leica TCS 4D CLSM<br />

unter Benutzung eines Ölapochromatobjektivs 63 × /1, 32 vorgenommen.<br />

Messung der 3D-PSF mit Hilfe von Fluoreszenzbeads. Üblicherweise<br />

wird die PSF eines CLSFM unter bestimmten standardisierten Bedingungen<br />

gemessen. Die für die konfokale Bildgewinnung in der Genomforschung<br />

relevante PSF weicht von diesen Bedingungen ab: es ist z.B. anzunehmen,<br />

dass der Brechungsindex des Mediums zwischen der zur Standardbestimmung<br />

der PSF benutzten Punktlichtquelle (in vielen Fällen ein Fluoreszenzbead<br />

mit einem Durchmesser

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