Medizinische Physik 3: Medizinische Laserphysik [2004]

10 Flusszytometrie 233
Abb. 10.6. Slit-Scan-Profil eines monozentrischen Chromosoms und eines dizentrischen
Chromosoms. Aufgetragen ist die relative Fluoreszenzintensität von Propidium
Jodid gegen die Flugzeit des Chromosoms durch den Laserfokus in Einheiten
von 10 ns. Bei konstanter Flussgeschwindigkeit entspricht dies der relativen Chromosomenlänge
(v = 10 m/s: 10 ns entsprechen 100 nm). Die senkrechten Linien
kennzeichnen Anfang und Ende des Profils sowie Zentromer- bzw. Maximumposition,
die automatisch berechnet werden. CI = Zentromerindex = relative Lage des
Zentromers auf dem Chromosom
Bei dem Slit-Scan-Verfahren bestimmen Signalfolge und Signallänge eines
Chromosomenprofils sowie die Flussgeschwindigkeit die Anforderung an ein
Datenverarbeitssystem. Für den Einsatz in der biologischen Dosimetrie ist
nicht nur eine entsprechende Verarbeitungsleistung wichtig, sondern auch eine
Mess- und Bedienungsumgebung, die den Routineeinsatz und die Analyse
großer Partikelzahlen in einer einzigen Messung ermöglicht. Das Fluoreszenzprofil
eines Chromosoms hat bei einer Flussgeschwindigkeit von 10 m/s und
einer typischen Chromosomenlänge von 2–15 µm eine zeitliche Länge von
0,2–1,5 µs. Dieses Signal wird mit einer solchen Frequenz digitalisiert, dass
kurze Signale noch aufgelöst, lange Signale aber nicht überabgetastet werden.
Für die Sortierung muss die Online-Analyse der Fluoreszenzparameter,
abhängig von der Frequenz des Piezokristalls an der Düse, in weniger als
500 µs (Zeit für den Chromosomenfluss zwischen Laserinteraktionspunkt und