3. Uluslararası Beyaz Et Kongresi

suşları pozitif kontrol olarak yüklendi. Aynı şekilde yürütülerek, görüntülendi.
Antibiyotik Direnç Testi
İzolatların antimikrobiyel duyarlılık profilleri disk difüzyon yöntemi ile belirlendi. İzolatların
antibiyotik dirençliliklerini tespit etmek amacıyla izolatlar Cooked Meat Medium’dan
alınan taze kültürden 5 ml’lik Tryptone Soya Brothda (TSB, Oxoid CM0129) 37°C’de,
0.5 McFarland (2 x 10 8 kob/ml) türbidite oluşana kadar, inkübe edildi. Türbidite kontrolü
NanoDrop spektrofotometrede (NanoDrop ND-100, Delaware, ABD) 625 nm dalga boyunda
absorbansları 0,08-0,10 olacak şekilde yapıldı. Zenginleştirilen suşlar steril svap yardımı ile 90
mm’ lik petrilere 4 mm kalınlığında dökülen Mueller Hinton agara (Oxoid CM 337) yayıldı.
Svap ile ekimin ardından 3-5 dakika petrilerin yüzeyindeki fazla sıvıyı çekmesi beklendikten
sonra her petriye merkezden merkeze uzaklıkları 24 mm olacak şekilde antibiyotik diskleri
yerleştirildi. Petriler 37°C’de anaerob ortamda 24 saat inkübasyona bırakıldı. İnkübasyon
sonunda antibiyotik disklerinin etrafındaki inhibisyon zonlarının çapları ölçüldü. Elde edilen
zon çapları, NCCLS’deki standartlar ile karşılaştırılarak suşlar antibiyotiklere karşı duyarlı, orta
dirençli veya dirençli olarak sınıflandırıldı
İstatistiksel Analizler
Mevsimsel farklılıkların piliç boyun derisi örneklerindeki C.perfringens prevalansı üzerine
etkisi istatistiksel olarak “ki kare” testi ile belirlendi (SPSS version 14.1, Ref. No: 4028472 ).
Bulgular
Klasik Kültür Sonuçları
Çalışmada analiz edilen 180 piliç boyun derisi örneğinin 39’unun (% 21,6) klasik kültür
yöntemiyle C. perfringens ile kontamine olduğu tespit edildi. Sırasıyla A, B, C mezbahalarından
alınan tavuk boyun derisi örneklerinin % 20,0 (12/60), % 25 (15/60) ve % 13,3 (8/60) oranında
C. perfringens ile kontamine olduğu tespit edildi.
PCR Sonuçları
Klasik kültür tekniği ile izole edilen C. perfringens’lerin doğrulanması amacıyla cpa gen
sekansı esas alınarak yapılan PCR analizinde 39 suşun 35’inin (% 89,7) cpa genine sahip
olduğu belirlendi. İzolatların hiçbirinin cpb, cpb2, etx, iA ve cpe genlerini taşımadığı tespit
edildi. Örneklerin aylara göre dağılımına bakıldığında, Aralık ayında incelenen 3, Ocak ayında
incelenen 8 ve Şubat ayında incelenen 2 numunenin C. perfringens ile kontamine olduğu bulundu.
Yaz ayları içerisinde ise Haziran’da 7, Temmuz’da 6 ve Ağustos’da 9 örneğin kontamine olduğu
tespit edildi. Ki kare testiyle yapılan istatistiksel analize göre piliç boyun derisi örneklerinin C.
perfringens ile kontaminasyon düzeyinde herhangi bir mevsimsel fark saptanmadı (p>0,05).
Antibiyotik Dirençlilik Sonuçları
Çalışmada PCR ile doğrulanan 35 C. perfringens izolatının 9 farklı antibiyotiğe karşı
direnç profilleri disk diffüzyon metodu ile araştırıldı. İzolatların 35’inin de (%100) en az bir
antibiyotiğe dirençli olduğu tespit edildi. Ayrıca 31 (% 88,5) C. perfringens izolatının 1’den
fazla antibiyotiğe direnç gösterdiği belirlendi. İzolatların tamamının (% 100) dirençli olduğu
antibiyotik trimetoprim olarak tespit edildi. Bu antibiyotik yanında, % 65,7 ile tetrasiklin, % 62,8
oranında gentamisin direncin yüksek oranda tespit edildiği diğer antibiyotikler olarak belirlendi.
Elde edilen veriler izolatların hepsinin vankomisine duyarlı olduğunu da ortaya koydu.
369