SEMNAS Hortikultura Buku 2 - Departemen Pertanian

Pemberian BAP, Kinetin dan 2-iP pada Media Kultur Jaringan untuk Inisiasi Embrio Somatik Durian
Triatminingsih, R, Joni, YZ dan Riska
mengandung auksin rendah maka akan terjadi bermunculan pro-embryo yang ditandai dengan
berkembangnya pro-embryo menjadi bipolar (Dixon 1985).
Zat pengatur tumbuh 2,4-D merupakan auksin yang mempunyai daya aktivitas kuat dan
merupakan auksin yang efektif untuk induksi kalus embriogenik dalam sistem regenerasi tanaman
melalui embriogenesis somatik (Purnamaningsih 2002, Priyono 2004). Konsentrasi yang optimum
berbeda-beda pada setiap spesies/jenis tanamannya (Sri Mariani at al. 2003, Riyadi & Tirtoboma
2004). Menurut Monmarson et al. (1995) konsentrasi 2,4-D yang terlalu tinggi pada awal kultur
pepaya dapat mengurangi pembentukan kalus dan menghambat pembentukan embriogenik.
Pembentukan dan proliferasi kalus terjadi akibat kontribusi kombinasi zat pengatur tumbuh BAP
dengan 2,4-D yang seimbang untuk pembelahan sel (Rianawati et al. 2009). Disamping itu
keberhasilan teknik somatik embryogenesis dipengaruhi antara lain oleh eksplan/jaringan yang
digunakan dan komposisi media (Boxtel & Berthouly 1996, Oktavia at al. 2003, Sumaryono at al.
2007).
Sumber karbon yang biasa digunakan dalam teknik kultur jaringan ialah sukrosa. Sukrosa
tersebut mempunyai 2 kepentingan sekaligus yaitu sebagai stimulan tekanan osmotik dalam proses
morphogenesis dan sebagai sumber karbon (De Wald et al. 1989). Sukrosa sebanyak 30 g/l atau 60
g/l memperbaiki produksi embrio somatik Palm (Alkhateeb 2006), bahkan untuk induksi
embriogenesis dan stadia awal embrio somatik mangga membutuhkan sukrosa tinggi, 50-60 g/l (De
Wald et al. 1989). Pemberian PEG 8000 dan perlakuan sukrosa dapat meningkatkan produksi embrio
somatik Palm, yang terbaik ialah PEG 8000 sebanyak 5% + sukrosa 60 g/l (Alkhateeb 2006).
Pada dasarnya semua bagian tanaman dapat diregenerasikan menjadi tanaman sempurna apabila
ditumbuhkan pada media yang sesuai (Dalal et al. 1991). Namun tidak semua bagian tanaman sama
mudahnya untuk diregenerasikan. Oleh karena itu perlu diketahui dan dipilih media yang sesuai dan
bagian tanaman/eksplan yang mudah untuk ditumbuhkan (Lindsey &Jones 1990, Monmarson et al.
1995). Kemampuan morphogenesis berhubungan dengan sel-sel yang berkompeten. Dengan
rangsangan ZPT yang tepat maka sel-sel yang berkompeten tersebut kemudian akan beregenerasi
(Gunawan 1992 dalam Oktavia at al. 2003).
Hasil penelitian tahun 2010, kalus embriogenik durian terbentuk pada media MS + 3 mg/l 2,4-D +
0,1 mg/l KIN atau MS + 3 mg/l 2,4-D + 0,1 mg/l BAP pada 6-12 minggu setelah kultur
(Triatminingsih et al. 2010). Proliferasi kalus durian dapat diperoleh dengan mensubkulturkan pada
media yang sama atau pada media MS + 5 mg/l 2,4-D + 0,1 mg/l KIN. Tujuan penelitian ialah
menetapkan komposisi media yang cocok untuk pembentukan embrio somatik.
BAHAN DAN METODE
Bahan dan Alat
Alat yang digunakan antara lain: autoclave, timbangan analitik, gelas piala, laminair air flow
cabinet, erlemeyer, botol kultur cawan petri, tabung reaksi, alumunium foil, plastik wrap, pipet, kertas
saring, scalpel, pinset, rak-rak kultur, mikroskop, shaker dan lain-lain. Bahan yang digunakan dalam
tahap peneitian ini ialah kalus embriogenik durian.
Metode Pelaksanaan Kegiatan
Induksi pembentukan embrio somatik durian
Materi Kalus yang telah disiapkan disubkultur ke media dasar MS yang dimodifikasi (MM),
sukrosa 30 g/l , ditambah vitamin Biotin.
D1B : MM + 0,1 ppm 2,4-D + 0,1 ppm Kinetin + Vit. Biotin.
D2B : MM + 0,05 ppm 2,4-D + 0,1 ppm Kinetin + Vit. Biotin.
D3B : MM + 0,1 ppm2,4-D + 0,1 ppm BAP + Vit. Biotin.
D4B : MM + 0,05 ppm 2,4-D + 0,1 ppm BAP + Vit. Biotin.
D5B : MM + 0,1 ppm 2,4-D + 3 ppm 2-iP + Vit. Biotin.
D6B : MM + 0,05 ppm 2,4-D + 3 ppm 2-iP + Vit. Biotin
Penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap, Perlakuan sebanyak 6 macam komposisi ZPT,
ditambah vitamin Biotin, masing-masing diulang 5-10 botol.
Prosiding SeminarNasional Pekan Inovasi Teknologi Hortikultura Nasional: Penerapan Inovasi Teknologi Hortikultura
dalam Mendukung Pembangunan Hortikultura yang Berdaya Saing dan Berbasis Sumberdaya Genetik Lokal,
Lembang, 5 Juli 2012
│45