PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

CGAL - Coordenação Geral de Apoio Laboratorial
CONTAGEM DE MICRORGANISMOS MESÓFILOS AERÓBIOS VIÁVEIS
Semear tubos com caldo vermelho de fenol-base adicionados de glicose.
Incubar a 36 ± 1ºC por até 72 horas.
A viragem de cor do indicador vermelho de fenol para amarelo indica a fermentação
do açúcar presente.
O Bacillus sporothermodurans não fermenta a glicose.
5.12 Redução de nitrato
Inocular a cultura, com alça, em tubos contendo caldo BHI-NO 3.
Incubar a 36 ± 1ºC por 72 horas.
Após incubação, adicionar aos tubos 0,5 a 1 mL de alfa naftilamina 0,5%, e 0,5 a 1 mL
de ácido sulfanílico 0,8%.
O aparecimento de coloração rosa indica positividade para redução de nitrato.
Quando não houver desenvolvimento de coloração, adicionar ao tubo alguns
miligramas de pó de zinco. Nessa situação, o aparecimento de coloração rosa indica
reação negativa, enquanto que o não desenvolvimento de cor indica positividade.
O Bacillus sporothermodurans não reduz o nitrato a nitrito.
5.13 Prova da uréase
Inocular a cultura, com alça, em tubos ou placas contendo ágar uréia.
Incubar a 36 ± 1ºC por 72h.
Observar o crescimento com mudança de coloração para rosa intenso, o que indica
positividade para produção de urease.
O Bacillus sporothermodurans não produz urease.
6. RESULTADOS
A partir dos dados obtidos, calcular o número de microrganismos mesóÞ los aeróbios
viáveis presentes na amostra em análise, seguindo as instruções contidas no Anexo
IV, “Procedimentos para contagem de colônias”, deste Manual.
O número de UFC/mL de Bacillus sporothermodurans não deverá ser reportado como
resultado da contagem de mesóÞ los aeróbios. Quando estes microrganismos forem
encontrados, fazer constar do campo “OBS” do CertiÞ cado OÞ cial de Análise (COA):
“Presença de Bacillus sporothermodurans”.
Somente será reportado o número de unidades formadoras de colônias de outros
mesóÞ los encontrados.
Deverão ainda acompanhar o resultado da análise informações adicionais sobre o tipo
de microrganismo encontrado (como por exemplo: cocos Gram positivos, bastonetes
Gram negativos, ß ora mista, etc.) ou o(s) microrganismo(s) aeróbio(s) presente(s),
quando identiÞ cado(s).
Os resultados de contagem de microrganismos mesóÞ los aeróbios viáveis em leite
UHT a 30ºC por até 72 horas devem ser expressos em UFC/mL.
Para todos os produtos UHT, o resultado da análise de pré-incubação por 7 dias a 36
± 1ºC deve ser expresso como “alterado” ou “sem alteração”.
7. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA
BRASIL. Ministério da Agricultura do Abastecimento e da Reforma Agrária. Secretaria de Defesa Agropecuária. Departamento
de Defesa Animal. Manual de métodos microbiológicos para alimentos. Coordenação Geral de Laboratório Animal.
1991/1992 2ª revisão. 136p.
PETTERSSON, B.; LEMBKE, F.; HAMMER, P.; STACKEBRANDT, E.; PRIEST, F.G. Bacillus sporothermodurans, a new species
producing highly-heat-resistant endospores. International Journal of Systematic Bacteriology, 1996. p. 759-764.
SWANSON, K.M.J.; PETRAN, R.L.; HANLIN, J.H. Culture methods for enumeration of microorganisms. In: Compendium
of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 4. ed. Washington DC. American Public Health
Association. Frances Pouch Downes & Keith Ito (Eds.), 2001. p. 53-62.
MORTON, R.D. Aerobic Plate Count. In: Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 4. ed. Washington
DC. American Public Health Association. Frances Pouch Downes & Keith Ito (Eds.), 2001. p.63-67.
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