PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

CGAL - Coordenação Geral de Apoio Laboratorial
CONTAGEM DE Staphylococcus aureus
A ausência de cocos Gram positivos indica teste negativo para Staphylococcus
aureus. A presença de cocos Gram positivos indica a necessidade da realização de
testes complementares.
5.7.2 Pesquisa de termonuclease
Fazer orifícios eqüidistantes com cerca de 2 mm de diâmetro no ágar para ensaio
de termonuclease ou no ágar azul de toluidina - DNA, em placas previamente
preparadas.
Colocar os tubos das culturas, mantidos em caldo BHI, em banho-maria fervente por
15 minutos.
Deixar esfriar e preencher completamente um orifício para cada cultivo a ser
analisado.
Incubar a 36 ± 1ºC por 4 horas ou a 50 ± 2ºC por 2 horas.
O aparecimento, ao redor dos orifícios, de um halo rosa no ágar azul de toluidina ou
de um halo de clariÞ cação no agar para ensaio de DNAse com verde de metila, será
indicativo de reação positiva para termonuclease.
Considerar como positivas as culturas que apresentarem halo de diâmetro superior a
1 mm. O Staphylococcus aureus é termonuclease positiva.
5.7.3 Prova da catalase
Com auxílio de alça de platina, bastão de vidro, palito de madeira ou Pipeta de Pasteur,
estéreis, retirar uma alíquota do cultivo em ágar estoque e transferir para uma lâmina
ou placa de vidro contendo uma gota de peróxido de hidrogênio a 3%.
Misturar o inóculo ao peróxido e observar a reação.
A não formação de borbulhas indica prova negativa para catalase.
A formação de borbulhas indica prova positiva para catalase.
O Staphylococcus aureus é catalase positiva.
6. RESULTADOS
Quando o número de colônias conÞ rmadas for igual ao número de colônias selecionadas
e repicadas, o resultado será igual à contagem inicial, levando-se em consideração a
diluição utilizada. Quando o número de colônias conÞ rmadas for diferente do número
de colônias selecionadas e repicadas, calcular a proporção de colônias positivas de
acordo com o Anexo IV, “Procedimentos para contagem de colônias”, deste Manual.
O resultado Þ nal será a soma dos resultados de colônias típicas e atípicas
conÞ rmadas.
Expressar o resultado como:
Contagem de Staphylococcus aureus: X x 10 y UFC/ g ou mL ou
Contagem de Staphylococcus coagulase positiva: X x 10 y UFC/ g ou mL.
7. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA
BENNETT, R.W.; LANCETTE, G.A. Staphylococcus aureus. In: Bacteriological
Analytical Manual Online. 2001. Disponivel em: http:// ww.cfsan.fda.gov
BRASIL. Ministério da Agricultura e do Abastecimento. Regulamentos técnicos de
identidade e qualidade de leite e produtos lácteos. Ministério da Agricultura e
do Abastecimento/ Secretaria de Defesa Animal/ Departamento de Inspeção de
Produtos de Origem Animal/ Divisão de Normas Técnicas. Brasília, D.F. Série
Regulamentação Técnica de Identidade e Qualidade de Produtos de Origem
Animal; n.2. 1997, 77p.
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