PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

CGAL - Coordenação Geral de Apoio Laboratorial
MEIOS DE CULTURA
Peptona de farinha de soja.....................................................................................5,0 g
Cloreto de sódio .....................................................................................................5,0 g
Ágar ......................................................................................................................15,0 g
pH 7,3 ± 0,2
45. Ágar soja triptona (TSA) com CaCl2 e eritrócitos lavados de carneiro
Manter frascos com 200 e 100 mL de TSA base, preparado conforme o item anterior,
em banho-maria a 45ºC.
Usar 200 mL dos frascos para preparar placas com uma camada base de cerca de
10 mL.
Deixar solidiÞ car em superfície plana.
A 100 mL de TSA base, adicionar 5 mL de eritrócitos lavados de carneiro e 1 mL de
uma solução de cloreto de cálcio 1M, mantendo o meio em banho-maria a 45ºC no
máximo por 15 minutos.
Pipetar uma segunda camada de 5 mL de ágar TSA com eritrócitos de carneiro e
cloreto de cálcio sobre a camada base solidiÞ cada.
46. Ágar soja triptona (TSA) sal 3%
Preparar o ágar soja triptona de acordo com as recomendações contidas neste
capítulo e adicionar 25 g de cloreto de sódio para cada litro de meio.
47. Ágar tiosulfato-citrato-sacarose-sais biliares (TCBS)
Pesar o ágar tiosulfato-citrato-sais biliares-sacarose (TCBS) de acordo com o volume
de meio a ser preparado, respeitando a proporção indicada pelo fabricante.
Transferir para recipiente adequado.
Adicionar o volume de água destilada/deionizada correspondente.
Deixar em repouso por cerca de 15 minutos.
Aquecer até completa dissolução.
VeriÞ car a necessidade de ajuste de pH, conforme norma especíÞ ca do laboratório.
Não autoclavar.
Distribuir, assepticamente, volumes de 15 mL em placas de Petri previamente
esterilizadas.
Antes do uso, secar a superfície do meio, colocando as placas semi-abertas e
invertidas em estufa a 45-50ºC por cerca de 15 minutos.
A composição básica de ágar tiosulfato-citrato-sais biliares-sacarose deverá ser a
seguinte, por litro de meio:
Extrato de levedura ................................................................................................5,0 g
Peptona de carne ...................................................................................................5,0 g
Peptona de caseína................................................................................................5,0 g
Tiosulfato de sódio ...............................................................................................10,0 g
Citrato de sódio ....................................................................................................10,0 g
Bile..........................................................................................................................5,0 g
Sacarose ..............................................................................................................20,0 g
Colato de sódio.......................................................................................................3,0 g
Cloreto de sódio ...................................................................................................10,0 g
Citrato férrico ..........................................................................................................1,0 g
Azul de bromotimol ...............................................................................................0,04 g
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