PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

Procedimentos e Normas para Exportações de Produtos Lácteos
amino-dimetilanilina) ou tiras para teste de oxidase;
Peróxido de hidrogênio 3%;
Alfa-naftilamina 0,5%;
Ácido sulfanílico 0,8%;
Zinco em pó;
Etanol 70% ou Etanol 70º GL;
Reagentes para coloração de Gram.
4. EQUIPAMENTOS
Equipamentos básicos obrigatórios em laboratórios de microbiologia de alimentos.
5. PROCEDIMENTOS
5.1 Preparo da amostra
Após pré-incubação, as amostras visualmente inalteradas devem ser agitadas por
25 vezes. Antes da abertura, desinfetar externamente as embalagens com solução
desinfetante e posteriormente com etanol 70% ou etanol 70º GL. Deixar secar.
Pesar 25 ± 0,2 g ou pipetar 25 ± 0,2 mL da amostra de acordo com as instruções
contidas no Anexo V, “Procedimentos para o preparo, pesagem e descarte de
amostras”, deste Manual.
Adicionar 225 mL de solução salina peptonada 0,1%.
A partir da diluição inicial 10 -1 , efetuar as diluições desejadas de acordo com o Anexo
II, “Diluições e soluções”, deste Manual.
5.2 Procedimentos de controle
Aplicar os procedimentos de controle especíÞ cos estabelecidos pelo laboratório.
5.3 Inoculação
Inocular 10 mL da diluição 10 -1 , 1 mL da diluição 10 -1 e 1 mL da diluição 10 -2 ,
separadamente, em três séries de três tubos contendo 10 mL de BHI-SE. Na primeira
série de tubos, que foram inoculados com 10 mL da diluição 10
-1 , usar o meio com
concentração dupla (BHI-SE2).
Incubar a 30 ± 1°C por 72 horas.
5.4 ConÞ rmação do crescimento
Finalizado o período de incubação, repicar todos os tubos sobre a superfície seca de
ABHI e de ágar nutriente isento de extrato de levedura, estriando de forma a obter
colônias isoladas.
Incubar a 30 ± 1ºC por até 72 horas.
5.5 Leitura
O crescimento nas placas será indicativo de presença de mesóÞ los aeróbios no tubo
de origem, porém será necessária a diferenciação entre Bacillus sporothermodurans
(que não é patogênico nem produz alteração do produto) e outros mesóÞ los aeróbios
capazes de alterar o alimento. Registrar o número de tubos que apresentaram
crescimento de colônias nas placas correspondentes, registrando em separado as
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ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DAS PEQUENAS E MÉDIAS
COOPERATIVAS E EMPRESAS DE LATICÍNIOS