PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

CGAL - Coordenação Geral de Apoio Laboratorial
NÚMERO MAIS PROVÁVEL de Vibrio parahaemolyticus
cromo, platina ou descartável estéril, inocular um tubo contendo caldo arginina sal
3%.
Inocular também um tubo contendo o meio base (sem adição do aminoácido) que
servirá de controle.
Cobrir os tubos com 2 a 3 mL de óleo mineral ou paraÞ na líquida, estéril.
Incubar a 36 ± 1ºC por, no máximo, 4 dias, juntamente com um tubo de caldo arginina
sal 3% não inoculado, que servirá de controle negativo.
Examinar os tubos todos os dias.
Durante o período de incubação, a cor do meio passa para amarela devido à
fermentação da glicose, e, ocorrendo a hidrólise da arginina, o meio retorna a cor
púrpura devido à produção de aminas primárias e dióxido de carbono.
O tubo controle, sem aminoácido, deve virar para amarelo e assim permanecer.
O Vibrio parahaemolyticus não hidrolisa a arginina.
5.5.7 Prova da fermentação do manitol e arabinose
A partir do cultivo mantido em caldo peptonado sal 3%, com auxílio de alça de níquelcromo,
platina ou descartável estéril, inocular um tubo contendo caldo vermelho de
fenol manitol sal 3% e outro tubo contendo caldo vermelho de fenol arabinose sal
3%.
Cobrir o meio com 2 a 3 mL de óleo mineral ou paraÞ na líquida, estéril.
Incubar a 36 ± 1ºC por 24 horas.
Após o período de incubação, observar a mudança de coloração dos meios de
vermelho para amarelo, devido à fermentação dos açúcares e conseqüente produção
de ácido.
99% das cepas de Vibrio parahaemolyticus fermenta o manitol.
50% das cepas de Vibrio parahaemolyticus fermenta a arabinose.
5.5.8 Teste do haloÞ lismo
A partir do cultivo mantido em caldo peptonado sal 3%, com auxílio de alça de níquelcromo,
platina ou descartável estéril, inocular tubos contendo caldo peptonado sal 6%
e 10%.
Incubar a 36 ± 1ºC por 24 horas.
Após o período de incubação, observar a presença de turvação nos meios.
O Vibrio parahaemolyticus cresce a 6% de sal e não cresce, ou apresenta crescimento
discreto, a 10% de sal.
5.5.9 Sensibilidade do agente vibriostático O/129
Esta prova é utilizada como diferencial entre Vibrio parahaemolyticus e V. vulniÞ cus.
Embeber um “swab” previamente esterilizado com a cultura suspeita mantida em
caldo peptonado sal 3% e inocular uma placa contendo ágar Müeller-Hinton sal 3% ou
agar soja triptona sal 3%, espalhando bem o inóculo, de forma a obter um crescimento
o mais homogêneo possível.
Deixar as placas absorverem o inóculo.
Colocar um disco do agente vibriostático O/129 com concentração de 10g e um disco
de concentração de 150g.
Incubar as placas a 36 ± 1ºC por 24 horas.
O Vibrio parahaemolyticus é resistente à concentração de 10g de agente
vibriostático O/129 enquanto o V. vulniÞ cus é sensível. Todos os víbrios são sensíveis
à concentração de 150g do agente O/129.
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