PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

Procedimentos e Normas para Exportações de Produtos Lácteos
CONTAGEM DE Bacillus cereus
1. OBJETIVOS E ALCANCE
Estabelecer procedimento para a contagem de Bacillus cereus;
Aplica-se a matérias primas e alimentos.
2. FUNDAMENTOS
2.1 Contagem
Baseia-se na inoculação das diluições desejadas das amostras sob teste em ágar
polimixina gema de ovo vermelho de fenol (MYP) ou em ágar cereus (PEMBA).
Em ambos é adicionada emulsão de gema de ovo que objetiva a veriÞ cação da
produção de lecitinase pelo B.cereus.
No ágar PEMBA, a presença de 0,1% de peptona associada ao piruvato de sódio
evidencia a precipitação da lecitina da gema do ovo adicionada ao meio.
A polimixina B é um agente seletivo utilizado nos dois meios, que atua sobre a ß ora
acompanhante. No PEMBA, quando um grande número de leveduras é esperado
no alimento, poderá ser adicionada também cicloheximide (40 g/mL) como agente
seletivo.
Estes dois meios contêm manitol, carbohidrato não fermentado pelo B.cereus. No
MYP, o indicador de pH é o vermelho de fenol e no PEMBA, o azul de bromotimol.
2.2 Provas Bioquímicas
A identiÞ cação bioquímica de Bacillus cereus baseia-se na veriÞ cação de produção
de ȕ-hemolisina, motilidade em meio semi-sólido, na capacidade de decomposição da
tirosina, redução do nitrato a nitrito, veriÞ cação do tipo de crescimento em superfície
de ágar nutriente, e da não produção de corpúsculos de inclusão cristalina.
3. REAGENTES E MATERIAIS
Vidraria e demais insumos básicos obrigatórios em laboratórios de microbiologia de
alimentos;
Solução salina peptonada 0,1%;
Ágar nutriente;
Ágar manitol gema de ovo polimixina segundo Mossel (MYP) ou Ágar cereus
(PEMBA);
Ágar estoque;
Ágar Columbia sangue de carneiro desÞ brinado;
Ágar tirosina;
Ágar motilidade - nitrato;
Ácido sulfanílico solução 0,8%;
Alfa-naftilamina solução aquosa 0,5%;
Polimixina B - solução contendo 5.000 UI/mL;
Emulsão de gema de ovo 50%;
394 G-100
ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DAS PEQUENAS E MÉDIAS
COOPERATIVAS E EMPRESAS DE LATICÍNIOS