PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

CGAL - Coordenação Geral de Apoio Laboratorial
MEIOS DE CULTURA
VeriÞ car a necessidade de ajuste de pH, conforme norma especíÞ ca do laboratório.
Adicionar a solução de azul de orto-toluidina.
Não é necessário esterilizar.
Distribuir em placas cerca de 25 mL e deixar solidiÞ car em superfície plana.
2. Ágar Bacillus larvae (ABL)
Preparar, separadamente, alíquotas de 100 mL de ágar cereus (PEMBA) base, ágar
soja triptona e ágar estoque de acordo com o descrito neste capítulo para cada um
dos meios especíÞ cos.
Fundir os meios e resfriar até 47 ±1ºC, mantendo em banho-maria.
Em um erlenmeyer estéril, com capacidade mínima de 500 mL, misturar:
Ágar cereus (PEMBA) base ........................................................................... 100,0 mL
Ágar soja triptona (TSA) ..................................................................................100,0 mL
Ágar estoque .................................................................................................. 100,0 mL
Emulsão de gema de ovo a 50% estéril (*) ......................................................30,0 mL
Solução de ácido pipemídico(H) 0,2% (**) ..........................................................3,0 mL
Solução de ácido nalidíxico(H) 0,1% (**).............................................................3,0 mL
(*) - último ingrediente a ser misturado para evitar a formação excessiva de espuma.
(**) - esterilizadas por Þ ltração
(H)
- hidropoluente.
Homogeneizar bem e distribuir cerca de 20 mL em placas estéreis.
Deixar solidiÞ car em superfície plana.
IdentiÞ car, datar e armazenar adequadamente.
Antes do uso, secar as placas invertidas, semi-abertas, em estufa a 45-50ºC por cerca
de 15 minutos.
3. Ágar Baird-Parker
Pesar o ágar Baird-Parker de acordo com o volume de meio a ser preparado,
respeitando a proporção indicada pelo fabricante.
Transferir para recipiente adequado e adicionar o volume de água destilada/deionizada
correspondente.
Deixar repousar por 15 minutos.
Aquecer até completa dissolução.
VeriÞ car a necessidade de ajuste de pH, conforme norma especíÞ ca do laboratório.
Distribuir em frascos apropriados, datar e identiÞ car o volume.
Autoclavar a 121 ± 1ºC por 15 minutos.
A composição básica do ágar Baird Parker deverá ser a seguinte, por litro de meio:
Extrato de carne .....................................................................................................5,0 g
Triptona ...............................................................................................................10,0 g
Extrato de levedura ................................................................................................1,0 g
Piruvato de sódio .................................................................................................10,0 g
Glicina ..................................................................................................................12,0 g
Cloreto de lítio (N/I) ....................................................................................................5,0 g
Ágar .....................................................................................................................20,0 g
pH 6,8 ± 0,2
(N) (I )
- nocivo por ingestão - irrita os olhos e a pele
Antes do plaqueamento, fundir e resfriar até cerca de 50ºC.
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