PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

CGAL - Coordenação Geral de Apoio Laboratorial
CONTAGEM DE Clostridium SULFITO REDUTORES E DE Clostridium perfringens
VeriÞ car a fermentação da raÞ nose pela viragem da cor do indicador vermelho de
fenol para amarelo.
As provas de liquefação da gelatina em 44 ± 2h horas e a fermentação da raÞ nose
em 72 ± 2h tornam possível a diferenciação entre Clostridium perfringens e outros
clostrídios imóveis e redutores de nitrato como o Clostridium celatum, Clostridium
sardiniense e Clostridium paraperfringens.
O Clostridium perfringens fermenta a raÞ nose dentro de 72 ± 2h.
CARACTERÍSTICAS DIFERENCIAIS DE CLOSTRÍDIOS
Meio motilidade nitrato
Meio lactose-gelatina
Liquefação.
Espécies de Clostridium Motilidade Nitrato Ácido/ gás
gelatina
C. perfringens A - + AG/T + (48h)
C.perfringens B - + AG/T + (48/72h)
C. absonum + + AG/CS -*
C. baratii - + AG/CS -
C. celatum - + AG/CS -
C. paraperfringens - + AG/CS -
C. sardiniense ± (+) AG/CS -*
A = ácido; AG = ácido e gás; T = turbidez; CS = claro com sedimento celular; + =
positiva; - = negativa; (+) = fraco; ± = motilidade fraca; * = hidrólise lenta da gelatina
6. RESULTADOS
6.1 Cálculo do número de Clostridium sulÞ to redutores presentes na amostra:
Calcular o número de Clostridium sulÞ to redutores multiplicando o número de colônias
negras contadas no ágar TSC ou no ágar SFP pelo fator de diluição usado, conforme
recomendações constantes do Anexo IV, “Procedimentos para contagem de colônias”,
deste Manual.
6.2 Cálculo do número de Clostridium perfringens
Considerar como Clostridium perfringens as colônias que se apresentarem, na
coloração de Gram, como bastonetes Gram positivos, retos, com extremidades
arredondadas, positivos para a prova de fermentação tempestuosa, imóveis, redutores
de nitrato, fermentadores da lactose em 44 ± 2h, da raÞ nose em até 72 ± 2h e capazes
de hidrolizar a gelatina em 44 ± 2h.
A partir dos dados obtidos, calcular o número de microrganismos presentes, de acordo
com o Anexo IV, “Procedimentos para a contagem de colônias”, deste Manual.
Expressar o resultado em UFC/g.
7. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA
RHODEHAMEL, E.J.; HARMON, S.M. Clostridium perfringens. In: Bacteriological Analytical Manual Online.
2001. Disponível em: http:// www.cfsan.fda.gov
LABBE, R.G. Clostridium perfringens. In: Compendium of Methods for the Microbiological Examination of
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MacFADDIN, J.F. Media for isolation-cultivation-identiÞ cation-maintenance of medical bacteria. Williams &
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