PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

Procedimentos e Normas para Exportações de Produtos Lácteos
5.9 Crescimento em anaerobiose
Inocular a cultura em tubos de ABHI inclinados e incubar em jarra de anaerobiose a
36 ± 1ºC por 72h.
O Bacillus sporothermodurans não cresce em anaerobiose.
5.10 Hidrólise da esculina
Inocular a cultura, com agulha, em tubos contendo ágar esculina inclinado.
Incubar a 36 ± 1ºC por até 72 horas.
A hidrólise da esculina é evidenciada pelo enegrecimento do meio.
O Bacillus sporothermodurans hidrolisa a esculina.
5.11 Fermentação da glicose
Semear tubos de caldo vermelho de fenol-base adicionados de glicose.
Incubar a 36 ± 1ºC por até 72 horas.
A viragem de cor do indicador vermelho de fenol para amarelo indica a fermentação
do açúcar presente.
O Bacillus sporothermodurans não fermenta a glicose.
5.12 Redução de nitrato
Inocular a cultura, com alça, em tubos contendo caldo BHI-NO 3.
Incubar a 36 ± 1ºC por 72 horas.
Após incubação, adicionar aos tubos 0,5 a 1 mL de alfa naftilamina 0,5%, e 0,5 a 1 mL
de ácido sulfanílico 0,8%.
O aparecimento de coloração rosa indica positividade para redução de nitrato.
Quando não houver desenvolvimento de coloração, adicionar ao tubo alguns
miligramas de pó de zinco. Nesta situação, o aparecimento de coloração rosa indica
reação negativa enquanto que o não desenvolvimento de cor indica positividade.
O Bacillus sporothermodurans não reduz o nitrato à nitrito.
5.13 Prova da uréase
Inocular com alça a superfície de placas ou tubos com ágar uréia previamente
preparadas.
Incubar a 36 ± 1ºC por até 72 horas.
Observar o crescimento com mudança de coloração para rosa intenso, o que indica
positividade para produção de urease.
O Bacillus sporothermodurans não produz urease.
6. RESULTADOS
Considerar positivos os tubos que apresentaram crescimento de outras bactérias
diferentes do Bacillus sporothermodurans e considerar como negativo quando não for
observado crescimento de colônias nas placas e quando o crescimento observado for
conÞ rmado como sendo somente de Bacillus sporothermodurans.
A partir dos resultados obtidos, consultando a tabela de NMP apropriada e seguindo
as instruções contidas no Anexo III, “Procedimentos básicos de contagem”, deste
Manual, calcular o número mais provável de microrganismos mesóÞ los aeróbios
viáveis presentes na amostra em análise.
418 G-100
ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DAS PEQUENAS E MÉDIAS
COOPERATIVAS E EMPRESAS DE LATICÍNIOS