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PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

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CGAL - Coordenação Geral de Apoio Laboratorial

PESQUISA DE Salmonella

Proteus sp. Esse meio apresenta em sua composição bile bovina e um corante derivado

do trifenilmetano (verde brilhante), responsáveis pela inibição de microrganismos

Gram positivos.

Como meio de maior impediência, utilizar MLCB ou Rambach ou XLD ou XLT4 ou

outro.

No ágar Rambach, a diferenciação entre Salmonella e outros microrganismos é

promovida pela presença de propilenoglicol, e também de um cromógeno que

evidencia a hidrólise da beta-galactosidase.

No ágar MLCB, a concentração de íons Magnésio promove o crescimento de

Salmonella. A presença de verde-brilhante inibe a ß ora acompanhante. Esse ágar

não utiliza a fermentação da lactose como sistema de identiÞ cação, o que possibilita

a detecção de cepas de comportamento atípico no BPLS. A produção de 2

S H é

evidenciada pelo enegrecimento do centro da colônia. Cepas de Salmonella 2

HS

negativas, como Salmonella Sendai, Salmonella Berta, Salmonella Pullorum e

Salmonella Seftenberg, podem produzir colônias azuis. É um meio que, associado ao

caldo de enriquecimento Rappaport Vassiliadis, tem sua seletividade substancialmente

aumentada. A Salmonella Typhi e a Salmonella Paratyphi não crescem nesse meio

devido à presença de verde-brilhante.

2.4 IdentiÞ cação bioquímica

Baseia-se na evidenciação das propriedades Þ siológicas e metabólicas das culturas

suspeitas: por meio da veriÞ cação da presença de citocromo oxidase; detecção

de pirrolidonil peptidase (PYRase) segundo Bennett et. al (1999); produção de

urease; fermentação da glicose, sacarose e lactose no meio TSI; detecção de betagalactosidase;

descarboxilação da lisina; produção de H 2

S; motilidade e produção de

indol.

Para conÞ rmação Þ nal, em casos de dúvida, realizam-se outras provas complementares,

baseadas na inoculação das culturas suspeitas em uma bateria miniaturizada de testes

padronizados. Os microtubos contendo substratos desidratados para cada teste são

reidratados pela adição da suspensão do microrganismo teste em diluente especíÞ co

para esta Þ nalidade.

2.5 Prova de soroaglutinação

Baseia-se na reação antígeno-anticorpo, com conseqüente aglutinação do antígeno

frente ao anti-soro para Salmonella polivalente “O”.

3. REAGENTES E MATERIAIS

Vidrarias e demais insumos básicos obrigatórios em laboratórios de microbiologia de

alimentos;

Ágar verde brilhante vermelho de fenol lactose sacarose (BPLS);

Ágar Rambach ou Ágar manitol lisina cristal violeta verde brilhante (MLCB) ou Ágar

XLD ou Ágar; XLT4 ou outro;

Ágar ferro três açúcares (TSI) ou Ágar Kligler (KIA);

Ágar estoque;

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