PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

Procedimentos e Normas para Exportações de Produtos Lácteos
NÚMERO MAIS PROVÁVEL de Vibrio parahaemolyticus
1. OBJETIVOS E ALCANCE
Estabelecer procedimento para a determinação do número mais provável de Vibrio
parahaemolyticus;
Aplica-se a amostras de pescado e derivados.
2. FUNDAMENTOS
2.1 Provas presuntivas
2.1.1 Enriquecimento em caldo seletivo
Inoculação em meio de cultura de enriquecimento seletivo: caldo glicose sal Teepol
(GSTB) ou caldo Horie arabinose violeta de etila (HAEB), em que a presença de Vibrio
parahaemolyticus é evidenciada pela turvação do meio após a incubação.
Em sua composição, o meio GSTB apresenta teepol, solução aquosa de sulfatos de
sódio alcalinos primários que atuam na membrana citoplasmática de microrganismos
Gram positivos, inibindo o seu crescimento e formalina que funciona como um agente
antimicrobiano.
Como o Vibrio parahaemolyticus é halóÞ lo obrigatório, os dois meios contém 3% de
cloreto de sódio.
2.1.2 Isolamento em ágar tiosulfato citrato sacarose sais biliares (TCBS)
Isolamento se realiza em ágar TCBS, meio seletivo altamente alcalino que contém
elevada concentração de tiossulfato e citrato de sódio, responsáveis pela inibição do
crescimento das enterobactérias presentes.
A bile e o colato de sódio inibem os enterococos. Como indicador de pH, o meio possui
o azul de timol e o azul de bromotimol que alteram a cor do meio para amarelo quando
da formação de ácido pelos microrganismos que fermentam a sacarose contida no
meio.
2.2. Provas de identiÞ cação
A identiÞ cação de Vibrio parahaemolyticus é feita por meio de provas bioquímicas,
sorológicas, morfológicas e tintoriais.
3. REAGENTES E MATERIAIS
Vidraria e demais insumos básicos obrigatórios em laboratórios de microbiologia de
alimentos;
Ágar Müeller-Hinton sal 3%;
Ágar nutriente sal 3%;
Ágar gelatina sal 3%;
Ágar soja triptona sal 3%;
Ágar tiosulfato citrato sacarose sais biliares (TCBS);
Ágar ferro três açúcares (TSI) sal 3% ou Ágar Kligler sal 3%;
Ágar motilidade sal 3%;
Caldo glicose sal teepol (GSTB) ou Caldo Horie arabinose violeta de etila (HAEB);
Caldo peptonado sem sal;
Caldo peptonado sal 3%;
Caldo peptonado sal 6%;
408 G-100
ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DAS PEQUENAS E MÉDIAS
COOPERATIVAS E EMPRESAS DE LATICÍNIOS