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PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

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CGAL - Coordenação Geral de Apoio Laboratorial

NÚMERO MAIS PROVÁVEL de Staphylococcus aureus

reação de termonuclease positiva.

3. REAGENTES E MATERIAIS

Vidraria e demais insumos básicos obrigatórios em laboratórios de microbiologia de

alimentos;

Ágar Baird-Parker-base;

Ágar azul de toluidina - DNA ou Ágar para ensaio de DNAse com verde de metila;

Ágar estoque;

Caldo soja triptona sal 10%-piruvato de sódio 1% (TSB-NP) ou Caldo telurito manitol

glicina segundo; Giolitti e Cantoni (GC);

Caldo cérebro-coração (BHI);

Solução salina peptonada 0,1%;

Solução salina 0,85%;

Solução de azul de toluidina 1%;

Emulsão de gema de ovo a 50%;

Telurito de potássio 3,5%;

Plasma de coelho oxalatado ou com EDTA;

Peróxido de hidrogênio 3%;

Etanol 70% ou Etanol 70º GL;

Reagentes para coloração de Grãm.

4. EQUIPAMENTOS

Equipamentos básicos obrigatórios em laboratórios de microbiologia de alimentos.

5. PROCEDIMENTOS

5.1 Pesagem e preparo da amostra

5.1.1 Alimentos sólidos

Pesar 25 ± 0,2 g da amostra de acordo com as instruções contidas no Anexo V,

“Procedimentos para o preparo, pesagem e descarte de amostras”, deste Manual.

Adicionar 225 mL de solução salina peptonada 0,1%.

Homogeneizar por aproximadamente 60 segundos no “stomacher”.

Esta é a diluição 10 -1 .

A partir da diluição inicial 10 -1 , efetuar as diluições desejadas de acordo com o Anexo

II, “Diluições e soluções”, deste Manual.

Inocular 1 mL de cada diluição selecionada em três séries de três tubos contendo

caldo telurito manitol glicina (GC) ou caldo TSB-NP.

Adicionar a cada tubo de caldo GC uma camada de 1 a 2 mL de selo estéril (vaspar,

vaselina, óleo mineral ou paraÞ na líquida, estéreis e previamente fundidos).

5.1.2 Alimentos líquidos

Pipetar 1 mL diretamente da amostra e tranferir para cada um dos três tubos contendo

caldo GC ou caldo TSB-NP.

Transferir também 1 mL da amostra para um tubo contendo 9 mL de solução salina

peptonada 0,1% (diluição 10 -1 ).

A partir da diluição inicial 10 -1 , efetuar as diluições desejadas de acordo com o Anexo

II, “Diluições e soluções”, deste Manual.

Inocular 1 mL das duas diluições subseqüentes em séries de três tubos com caldo GC

ou caldo TSB-NP.

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