PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

CGAL - Coordenação Geral de Apoio Laboratorial
TESTE DE ESTERILIDADE COMERCIAL PARA ALIMENTOS DE BAIXA ACIDEZ – pH > 4,6
5.6 Leitura e Interpretação
VeriÞ car, nos tubos contendo caldo de carne cozida ou caldo Tarozzi, a formação de
gás, a turvação do meio e possível alteração na aparência da carne do meio, sinais
indicativos de crescimento bacteriano.
Os clostrídios sacarolíticos produzem ácido e gás com odor “ácido”, sem a digestão
da carne cozida mas com conseqüente avermelhamento da mesma.
Os clostrídios proteolíticos degradam a proteína em aminoácidos, com a precipitação
da tirosina na forma de cristais brancos, produzindo um odor fétido de compostos
sulfurados com conseqüente enegrecimento da carne cozida e turvação do caldo.
VeriÞ car, nos tubos com caldo glicose triptona, se ocorreu turvação e/ou formação de
película na superfície do caldo, alterações que indicam crescimento bacteriano.
Considerar como negativo o teste para a esterilidade comercial quando não se
observar nenhuma das alterações citadas acima e os controles corresponderem aos
resultados esperados.
Dar seqüência ao teste quando forem observadas quaisquer das alterações citadas
acima e os controles corresponderem aos resultados esperados.
5.6.1 ConÞ rmação de tubos com crescimento positivo ou suspeito
Os tubos suspeitos de apresentarem crescimento devem ser repicados por estriamento
em placas de ABHI, conforme segue:
5.6.1.1 Quando o tubo suspeito for o de caldo glicose triptona incubado a 36 ± 1ºC
(aeróbios mesóÞ los) repicar concomitantemente para duas placas com ABHI. Incubar
uma destas placas a 55 ± 1ºC e a outra a 36 ± 1ºC por 24 a 48 horas.
5.6.1.2 Quando o tubo suspeito for o de caldo glicose triptona incubado a 55 ± 1ºC
(aeróbios termóÞ los) repicar para uma placa com ABHI. Incubar a 55 ± 1ºC por 24 a
48 horas.
5.6.1.3 Quando o tubo suspeito for o de caldo de carne cozida (ou de caldo Tarozzi),
incubado a 36 ± 1ºC (anaeróbio mesóÞ lo) ou a 55 ± 1ºC (aeróbios termóÞ los), repicar
para uma placa com ABHI. Incubar por 24 a 48 horas, na mesma temperatura de
incubação usada para o tubo de origem (36 ± 1ºC ou 55 ± 1ºC), em anaerobiose.
5.6.2 Leitura
Após a incubação, veriÞ car o crescimento de microrganismos nas placas.
O não crescimento indicará resultado negativo para o teste de esterilidade comercial.
Quando for veriÞ cado crescimento nas placas, repicar as culturas obtidas para tubos
com ágar estoque inclinado e incubar nas mesmas condições das placas de origem.
Após incubação, realizar os testes complementares a seguir:
5.7 Testes complementares
5.7.1 Coloração de Gram
A partir das colônias que crescerem nas placas, preparar esfregaço e corar pelo
método de Gram, conforme instruções constantes do Anexo VII, “Procedimentos de
coloração”, deste Manual.
Quando for veriÞ cada a presença de bastonetes Gram positivos nos tubos incubados
em anaerobiose, a realização da prova de catalase é necessária para a diferenciação
entre Bacillus sp (catalase positiva) e Clostridium sp (catalase negativa).
Registrar no resultado Þ nal a morfologia dos cultivos celulares isolados observada.
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