PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

Procedimentos e Normas para Exportações de Produtos Lácteos
OBS.: Os suplementos podem ser adquiridos em forma de vial (comercialmente
disponível), necessitando apenas a suspensão em diluente antes de seu uso. VeriÞ car
sempre a composição, comparando com aquela indicada nesta metodologia.
4. EQUIPAMENTOS
Equipamentos básicos obrigatórios em laboratórios de microbiologia de alimentos.
Estereoscópio com iluminação em ângulo de 45º.
5. PROCEDIMENTOS
5.1 Preparo da Amostra
Acrescentar à alíquota de 25 ± 0,2 g ou mL da amostra preparada conforme Anexo V,
225 mL de caldo UVM adicionado de seu suplemento.
OBS.: VeriÞ car a formulação do Caldo UVM ou LEB. Algumas marcas de caldo UVM já
contêm em sua formulação ácido nalidíxico e acriß avina. O caldo LEB já contém ácido
nalidíxico, bastando a suplementação com 0,25 mL de solução 1% de acriß avina.
5.2 Procedimentos de controle
Aplicar os procedimentos de controle especíÞ cos estabelecidos pelo laboratório.
5.3 Primeiro enriquecimento seletivo
Homogeneizar as alíquotas preparadas conforme item 5.1 e incubar a 30 ± 1ºC por 24
horas.
5.4 Segundo enriquecimento seletivo
Após a incubação, transferir 0,1 mL da cultura para tubo contendo 10mL de caldo Fraser
suplementando-o, se necessário, com 0,1 mL do vial diluído conforme a indicação do
fabricante.
OBS.:Alguns fabricantes de caldo Fraser fornecem o meio já pronto para o uso;
outros fornecem o meio adicionado de ácido nalidíxico e de acriß avina, bastando a
suplementação com citrato de amônio e ferro III (0,1 mL de solução a 5% equivalente
a 250 mg/0,5L de meio).
Incubar a 30 ± 1ºC por 24 a 48 horas.
5.5 Isolamento
5.5.1 Amostras de produtos cárneos
Utilizando alça de platina de 5 mm de diâmetro, repicar do caldo Fraser para placas
contendo ATN e placas contendo AP suplementado, sendo que as placas devem estar
com as superfícies secas, de forma a proporcionar a obtenção de colônias isoladas.
Opcionalmente, pode ser usado o ATNS em paralelo com os meios ATN e AP.
Incubar as placas de ATN a 30 ± 1ºC por 24 horas e as placas de AP e ATNS, na mesma
temperatura, por 24 a 48 horas.
5.5.2 Amostras de produtos lácteos
Utilizando alça de platina de 5 mm de diâmetro, repicar do caldo Fraser para placas
contendo AO suplementado e placas contendo AP suplementado, sendo que as placas
440 G-100
ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DAS PEQUENAS E MÉDIAS
COOPERATIVAS E EMPRESAS DE LATICÍNIOS