PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

Procedimentos e Normas para Exportações de Produtos Lácteos
Caldo verde brilhante bile 2% lactose;
Caldo EC;
Solução salina peptonada 0,1%.
4. EQUIPAMENTOS
Equipamentos básicos obrigatórios em laboratórios de microbiologia de alimentos;
Banho-maria com movimentação de água (agitação ou circulação).
5. PROCEDIMENTOS
5.1 Pesagem e preparo da amostra
Pesar 25 ± 0,2 g ou pipetar 25 ± 0,2 mL da amostra de acordo com as
instruções contidas no Anexo V, “Procedimentos para o preparo, pesagem e descarte
de amostras”, deste Manual.
Adicionar 225 mL de solução salina peptonada 0,1%.
Homogeneizar por aproximadamente 60 segundos em “stomacher”.
Esta é a diluição 10 -1 .
5.2 Procedimentos de controle
Aplicar os procedimentos de controle especíÞ cos estabelecidos pelo laboratório.
5.3 Prova presuntiva
5.3.1. Inoculação
A partir da diluição inicial (10 -1 ), efetuar as demais diluições desejadas em solução
salina peptonada 0,1% de acordo com as instruções contidas no Anexo II, “Diluições
e soluções”, deste Manual.
Inocular 1 mL de cada diluição desejada em placas de Petri esterilizadas.
Adicionar a cada placa cerca de 15 mL de VRBA previamente fundido e mantido a
46ºC - 48ºC em banho-maria.
Homogeneizar cuidadosamente e deixar em repouso até total solidiÞ cação do meio.
Adicionar, sobre cada placa, cerca de 10 mL de VRBA previamente fundido e mantido
a 46ºC - 48ºC em banho-maria, formando uma segunda camada de meio. Deixar
solidiÞ car.
5.3.2 Incubação
Após completa solidiÞ cação do meio, incubar as placas em posição invertida em
temperatura de 36 ± 1°C por 18 a 24 horas.
5.3.3 Leitura
Selecionar placas que contenham entre 15 e 150 colônias.
Contar as colônias que apresentarem morfologia típica de coliformes, ou seja, colônias
róseas, com 0,5 a 2 mm de diâmetro rodeadas ou não por uma zona de precipitação
da bile presente no meio. Anotar os resultados de contagem.
Contar separadamente colônias típicas e atípicas e submeter 3 a 5 colônias, de cada
uma, às provas conÞ rmativas.
5.4 Provas conÞ rmativas
5.4.1 Coliformes totais
5.4.1.1 Inoculação
392 G-100
ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DAS PEQUENAS E MÉDIAS
COOPERATIVAS E EMPRESAS DE LATICÍNIOS