PROCEDIMENTOS E NORMAS PARA EXPORTAÇÕES DE PRODUTOS LÁCTEOS - G100

CGAL - Coordenação Geral de Apoio Laboratorial
CONTAGEM DE Bacillus cereus
Sangue de carneiro desÞ brinado;
Ácido acético 5N;
Zinco em Pó;
Reagentes para coloração de corpúsculos de inclusão cristalina;
Reagentes para coloração de Gram.
4. EQUIPAMENTOS
Equipamentos básicos obrigatórios em laboratórios de microbiologia de alimentos.
5. PROCEDIMENTOS
5.1 Pesagem e preparo da amostra
Pesar 25 ± 0,2 g ou pipetar 25 ± 0,2 mL da amostra de acordo com as instruções
contidas no Anexo V, “Procedimentos para o preparo, pesagem e descarte de
amostras”, deste Manual.
Adicionar 225 mL da solução salina peptonada 0,1%.
Homogeneizar por aproximadamente 60 segundos em “stomacher”.
Esta é a diluição 10 -1 .
5.2 Procedimentos de controle
Aplicar os procedimentos de controle especíÞ cos estabelecidos pelo laboratório.
5.3 Inoculação
A partir da diluição inicial 10 -1 , efetuar as diluições desejadas conforme o Anexo II,
“Diluições e soluções”, deste Manual.
Inocular sobre a superfície seca do ágar MYP ou ágar PEMBA 0,1 mL de cada diluição
selecionada.
Com auxilio de alça de Drigalski ou bastão tipo “hockey”, espalhar o inóculo
cuidadosamente por toda a superfície do meio até completa absorção.
Utilizar, no mínimo, duas diluições decimais ou duplicata da mesma diluição.
Nos casos em que for necessária a obtenção de resultado menor que 100 UFC/g ou
mL distribuir 1 mL da diluição 10 -1 em 3 placas (0,4 mL, 0,3 mL e 0,3 mL).
No caso de amostras líquidas, poderá ser inoculado 0,1 mL diretamente da amostra.
5.4 Incubação
Incubar as placas invertidas a 30 ± 1ºC por 30 a 48 horas.
5.5 Leitura
Selecionar as placas que contenham entre 15 e 150 colônias.
Contar as colônias rodeadas por um halo de precipitação opaco sobre um fundo róseo,
no ágar MYP e azul turquesa com aspecto recortado, com cerca de 5 mm de diâmetro
e rodeadas por halo de precipitação de lecitina hidrolizada, no ágar PEMBA.
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