PATOLOGÍA RESPIRATORIA - Neumomadrid

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S. Alcolea Batres et al
Para su realización, debemos de enclavar el broncofibroscopio en el
bronquio elegido, después de su anestesia, instilando a través de su canal
interno el suero salino fisiológico en sucesivas alícuotas, para su posterior
recolección por medio de la aspiración conectada al broncoscopio. Por lo
general, suele recuperarse más del 40% del volumen instilado, aunque cantidades
menores también deben ser valoradas.
PROCESAMIENTO Y ELEMENTOS MEDIBLES
En el líquido recuperado se pueden analizar diversos componentes, entre
los que figuran: células, sustancias químicas en solución, microorganismos,
partículas minerales y citocinas.
Para obtener el mayor rendimiento, el líquido se debe procesar en las
primeras cuatro horas, y si esto no fuera posible, se deberá almacenar a una
temperatura de 4 ºC. Para el componente bioquímico, se puede congelar el
sobrenadante a – 70 ºC para su posterior análisis:
- Análisis celular: El método empleado, así como las diferentes poblaciones
celulares a estudiar, se pueden ver en la Figura 1. En el sujeto normal, no
fumador, el número total de células obtenido oscila entre 10 x 10 4 y
70 x 10 4 por mililitro. En el recuento porcentual, un 80 – 90% son macrófagos,
5 – 15% linfocitos, menos del 3% polinucleares neutrófilos y menos
del 1% eosinófilos y basófilos. Dentro de la población linfocitaria, aproximadamente
un 60 – 90% son linfocitos T (CD3+), de los cuales el 40 –
50% son (CD4+) y un 20 – 30% (CD8+), con un cociente CD4/CD8 de
1,4 – 1,8. Linfocitos B y linfocitos NK, existirán en un 5 – 10%. Una
diferente proporción puede sugerir diferentes enfermedades (Tabla 1).
Recepción líquido de LBA
Centrifugación a 300-600 g durante 5-10 minutos
Sobrenadante
Citocinas, marcadores,...
Marcadores celulares con
anticuerpos monoclonales
Botón celular
- Suspensión celular en 1,5 ml de suero PBS o solución de Kanks
sin calcio ni magnesio.
- Recuento en cámara de Neubauer, número total de células.
- Tinción con Azul Tripan, viabilidad celular.
- Ajuste de celularidad 1-1,5 millones por ml.
- Citocentrifugación (70-100.000 células a 500 g 5-10 minutos.
Poblaciones linfocitarias
Aspecto cuantificación
• May-Grunwald-Giemsa: % células.
• Papanicolau: células neoplásicas.
• Perls: hemosiderógrafos.
FIGURA 1. Procesamiento del líquido del lavado broncoalveolar para estudio celular.