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30845 Suppl Giot.pdf - Giornale Italiano di Ortopedia e Traumatologia

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G.I.O.T. 2010;36(suppl. 1):S162-S164<br />

uso <strong>di</strong> staminali da tessuto periferico: potenzialità rigenerative<br />

<strong>di</strong> emocomponenti leuco-piastrinici per uso topico<br />

F. Biggi, G. Caloprisco * , a. Borean *<br />

rIaSSuNTO<br />

Attualmente per indurre stimoli rigenerativi in lesioni <strong>di</strong> <strong>di</strong>fficile<br />

guarigione (ossee, ten<strong>di</strong>nee, cutanee) si utilizzano, oltre alle tecniche<br />

<strong>di</strong> ingegneria tissutale, anche emocomponenti umani come<br />

la colla <strong>di</strong> fibrina, il gel <strong>di</strong> piastrine e aspirati <strong>di</strong> midollo osseo.<br />

Vari sono i meto<strong>di</strong> <strong>di</strong> produzione <strong>di</strong> questi emocomponenti e<br />

<strong>di</strong>versi sono i livelli <strong>di</strong> qualità che si possono ottenere. La colla<br />

<strong>di</strong> fibrina fornisce il solo scaffold, il gel <strong>di</strong> piastrine i fattori <strong>di</strong><br />

crescita e l’aspirato midollare le cellule staminali. La normale<br />

fisiologia della rigenerazione vede però coinvolti tutti questi<br />

componenti, che <strong>di</strong>fettano nei pazienti portatori <strong>di</strong> lesioni <strong>di</strong> <strong>di</strong>fficile<br />

guarigione.<br />

Date queste premesse, abbiamo validato e standar<strong>di</strong>zzato una procedura<br />

per ottenere un concentrato leuco-piastrinico (CLP) ricco<br />

in fibrinogeno, che integra lo stimolo dei fattori <strong>di</strong> crescita con<br />

la presenza <strong>di</strong> cellule implicate nei processi rigenerativi: monociti<br />

e cellule staminali. L’utilizzo del separatore cellulare, per la<br />

raccolta da sangue periferico, <strong>di</strong> questo emocomponente ha permesso<br />

<strong>di</strong> realizzare mo<strong>di</strong>ficando alcuni parametri <strong>di</strong> separazione<br />

e con manipolazioni minime, un prodotto standar<strong>di</strong>zzato, sicuro,<br />

con buone potenzialità rigenerative e a costi contenuti. Tutto<br />

nel rispetto della normativa che regola l’utilizzo dei prodotti per<br />

me<strong>di</strong>cina rigenerativa: Regolamento (CE) n.1394/2007.<br />

Parole chiave: rigenerazione, fattori <strong>di</strong> crescita, monociti, cellule<br />

staminali, emocomponenti<br />

SuMMary<br />

Currently to induce regeneration in non-healing lesions (bone, tendon,<br />

skin) are used in ad<strong>di</strong>tion to tissue engineering, also human<br />

blood components such as fibrin glue, platelet gel and bone marrow<br />

aspirates.<br />

There are various methods of producing these components and<br />

have <strong>di</strong>fferent levels of quality that you can get. The fibrin glue<br />

provides the only scaffold, gel platelet the growth factors, and<br />

UOA <strong>di</strong> Ortope<strong>di</strong>a e <strong>Traumatologia</strong> Ospedale San Martino <strong>di</strong> Belluno, Belluno;<br />

* Dipartimento <strong>di</strong> Immunoematologia e Me<strong>di</strong>cina Trasfusionale Ospedale San<br />

Martino <strong>di</strong> Belluno.<br />

In<strong>di</strong>rizzo per la corrispondenza:<br />

Francesco Biggi, UOA <strong>di</strong> Ortope<strong>di</strong>a e <strong>Traumatologia</strong>, Ospedale San Martino, viale<br />

Europa 22, 32100 Belluno. Tel. +39 0437 516490. Fax +39 0437 516492.<br />

E-mail: francesco.biggi@ulss.belluno.it<br />

S162<br />

aspirates bone marrow the stem cells. The normal physiology of<br />

regeneration involved but sees all these components.<br />

In this context, we validated and standar<strong>di</strong>zed a procedure for<br />

obtaining a leuco-platelet concentrated (CLP) rich in fibrinogen,<br />

which combines the stimulation of growth factors with the presence<br />

of cells involved in regenerative processes: stem cells and<br />

monocytes.<br />

The cell separator allowed then to realize, by changing some<br />

parameters of separation and with minimal manipulation, a product<br />

standar<strong>di</strong>zed, safe, with good regenerative potential and low cost.<br />

All in compliance with governing laws the use of products for<br />

regenerative me<strong>di</strong>cine: Regulation (EC) n.1394/2007.<br />

Key words: regeneration, growth factors, monocytes, stem cells,<br />

blood components<br />

INTrODuzIONE<br />

Da alcuni anni grande interesse stanno suscitando i risultati, in<br />

<strong>di</strong>versi ambiti clinici, <strong>di</strong> stu<strong>di</strong> che sembrano preannunciare lo sviluppo<br />

<strong>di</strong> una nuova prospettiva terapeutica: la riparazione dei tessuti<br />

me<strong>di</strong>ante applicazione, infusione o iniezione intraparenchimale<br />

<strong>di</strong> alcuni tipi <strong>di</strong> cellule coinvolte nella rigenerazione, come cellule<br />

staminali, monociti e piastrine 1-3 .<br />

Altamente innovativa appare l’ambizione <strong>di</strong> controllare i processi<br />

cellulari e l’abilità <strong>di</strong> raccogliere, mo<strong>di</strong>ficare, amplificare e attivare<br />

cellule, rendendole capaci <strong>di</strong> restaurare strutture e funzioni tissutali.<br />

Questo è reso possibile dalla manipolazione cellulare che può<br />

essere più o meno complessa in relazione al tipo e grado <strong>di</strong> mo<strong>di</strong>ficazione<br />

che il processo produttivo implica nel prodotto cellulare o<br />

tissutale e che è normata dal Regolamento CE n. 1394/2007. I due<br />

criteri presi in considerazione nel Regolamento CE n. 1394/2007<br />

per <strong>di</strong>stinguere i prodotti <strong>di</strong> me<strong>di</strong>cina rigenerativa assimilabili ai<br />

farmaci da quelli non assimilabili sono: 1) il grado <strong>di</strong> manipolazione;<br />

2) la relazione fra origine delle cellule del prodotto e sede <strong>di</strong><br />

applicazione. Mentre il primo criterio risulta ben definito ed è chiaramente<br />

co<strong>di</strong>ficato nell’Allegato I del Regolamento CE 1394/2007,<br />

il secondo è meno definito e si presta a <strong>di</strong>verse interpretazioni.<br />

In questo contesto da oltre <strong>di</strong>eci anni l’U.O. <strong>di</strong> Ortope<strong>di</strong>a e il<br />

Dipartimento <strong>di</strong> Me<strong>di</strong>cina Trasfusionale <strong>di</strong> Belluno, collaborano<br />

per la produzione e applicazione <strong>di</strong> emocomponenti da sangue<br />

periferico per uso topico-rigenerativo, in grado <strong>di</strong> a<strong>di</strong>uvare la riparazione<br />

<strong>di</strong> lesioni tissutali <strong>di</strong> <strong>di</strong>fficile guarigione (osso, legamenti,<br />

ten<strong>di</strong>ni, cartilagine e cute) 4 .<br />

Scopo: obiettivo del lavoro degli ultimi anni è stato quin<strong>di</strong> la<br />

standar<strong>di</strong>zzazione e validazione <strong>di</strong> una procedura per ottenere un<br />

concentrato leuco-piastrinico (CLP) ricco in fibrinogeno, dove

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