JAHRESBERICHT 2000/2001 - Fritz Thyssen Stiftung

Degenerative
Nierenerkrankungen
MEDIZIN UND NATURWISSENSCHAFTEN 238
– Wie werden die Gene, die das WT1-Protein reguliert, bei Patienten
mit nephrotischem Syndrom exprimiert? Welche Unterschiede
bestehen zu gesunden Personen?
– Werden ausser den bereits bekannten Genen noch weitere durch
das WT1-Protein auf der Ebene der Transkription reguliert, und
um welche Gene handelt es sich? Welche Unterschiede bestehen
zwischen gesunden und erkrankten Personen?
– Sind strukturelle Veränderungen im Nierengewebe beim nephrotischen
Syndrom auf die Veränderungen des WT1-Gens zurückzuführen?
Eine Überexpression bestimmter Gene, die von dem WT1-Protein reguliert
werden, könnte als Ursache für das nephrotische Syndrom in
Frage kommen. Aus diesem Grund wurde die Expression von Pax-2,
Bcl2 und IGF2 in normalem Nierengewebe und Gewebe von fünf erkrankten
Patienten untersucht. Es zeigte sich kein Unterschied zwischen
normalem und erkranktem Gewebe. Somit ist vermutlich eine
Fehlregulation dieser Gene nicht die Ursache des nephrotischen
Syndroms. Weiterhin wurden mit immunhistochemischen Methoden
typische Bestandteile der glomerulären Basalmembran und des Podozytenzytoskeletts
bei gesunden und erkrankten Personen untersucht.
Erste Ergebnisse deuten darauf hin, dass bestimmte Proteine
fehlreguliert sind und somit bei erkrankten Personen zu einer Proteinurie
führen können. Die Analyse weiterer WT1-regulierter Gene
und weiterer Bestandteile der glomerulären Filtrationsbarriere sind
geplant.
In einem weiteren Ansatz wird das Expressionsprofil von gesunden
und erkrankten Glomeruli erstellt und verglichen, um möglichst ein
Gesamtbild über alle Unterschiede zu erhalten. Damit sollen alle
Gene identifiziert werden, deren Fehlregulation das nephrotische
Syndrom verursachen könnte. Hierfür wurden Glomeruli mittels Laser
aus gefrorenem Gewebe mikrodissektiert, die RNA isoliert und
amplifiziert und nach der radioaktiven Markierung auf Arrays hybridisiert.
Bis jetzt ist das Expressionsprofil von einem gesunden und einem
erkrankten Gewebe erstellt worden. Um signifikante Aussagen
machen zu können, werden noch drei normale und drei erkrankte
Nieren untersucht. Zusätzlich werden mit demselben Ansatz normale
und erkrankte Podozyten aus Zellkulturen untersucht. Alle Array-Ergebnisse
müssen anschliessend mit immunhistochemischen
Methoden oder mittels Real-time PCR verifiziert werden.
Dr. A. Fuchshuber und PD Dr. F. Hildebrandt, Universitäts-Kinderklinik,
Freiburg, wurde eine Sachbeihilfe für die Identifizierung des
Gens für die autosomal dominante „medullary cystic kidney disease“
Typ 1 (MCKD1) bewilligt.
Bei der autosomal-dominanten Nierenerkrankung „medullary cystic
kidney disease“ Typ 1 (MCKD1) bilden sich im Nierenmark Zysten,
die zu einem rasch fortschreitenden Funktionsverlust der Nieren