4. Uluslararası Beyaz Et Kongresi

yönteme göre) sonra SF9 hücrelerce rekombinant N proteini üretildi. SPF civcivler rekombinant
N proteini ile adjuvantlı ve adjuvatsız olarak immünize edildi. Elde edilen N proteini ile farklı
sürülerden toplanan IBV ile aşılı ve IBV pozitif tavuk serumlarının verdiği reaksiyon Western
immunobloting ile incelendi. Rekombinant N proteini kullanılarak kurum içi ELISA testi
geliştirmeye yönelik çalışmalar yapıldı.
Bulgular
TagMan Real Time RT-PCR ve Filogenetik Analizler
İncelenen civcivlerde ve tavuklarda, solunum bozuklukları, depresyon, tüy
deformasyonu ve gelişme geriliği gibi belirtiler görüldü. TaqMan real time RT-PCR ile yapılan
analizler sonucunda, örnek alınan 108 Broyler çiftliğin 98’inde (%91) ve 26 yumurtacı çiftliğin
16’sında (%61) infeksiyöz bronşitis virusu saptandı. Pozitif örnekler ve pozitif kontrolde C T
değerinin 25 ile 39. siklus aralığında olduğu görüldü (Şekil 1). Negatif kontrol ve negatif
örneklerde C T
değeri görülmedi.
Şekil 1. Pozitif bulunan bazı doku örneklerinin Real-time RT-PCR görüntüsü: a:trakea, b:trakea,
c-d:akciğer, trakea; e:10 -3 sulandırılmış pozitif kontrol; f:trakea, g:akciğer, h:trakea, ı:böbrek;
i:trakea; j:trakea; k:akciğer, trakea, akciğer, trakea, l:negatif örnekler ve negatif kontrolReal time
RT-PCR ile pozitif bulunan örnekler, sekans analizi için RT-PCR ile incelendiğinde agaroz jel
elektroforezde 393bp ürün elde edildi. Bu örneklerin sekans analizi ticari firma (Medsantek)
tarafından yapıldı. Broylerlerde saptanan ve sekanslanabilen 73 örneğin sekans ve filogenetik
analizleri sonucunda oluşturulan soyağaçlarına göre; 2 (%2.7) örneğin Grup-1’de yer alan 793/B
genotipine (GI-13), 59 örneğin (%80.8) Grup-2’de yer alan İsrail varyant-2 genotipine (GI-
23), 10 örneğin (%13.6) Grup-3’de yer alan Ma5, M41, H120 genotiplerine (GI-1), 2 örneğin
(%2.7) Morocco suşu genotipine (GI-13) ve 1 örneğin (%1.3) D274 genotipine benzer olduğu
belirlendi. Yumurtacılarda saptanan ve sekanslanabilen 8 örneğin sekans ve filogenetik analizleri
sonucunda oluşturulan soyağaçlarına göre; 1 örneğin (%12.5) Massachuset (GI-1) ve 7 (587.5)
örneğin 793/B ve İsrail varyant-1 genotiplerine (GI-13) benzer olduğu bulundu.
272