4. Uluslararası Beyaz Et Kongresi

Materyal ve Metot
Çalışmada Kars’ta et ve et ürünleri satışı yapan toptancılar ve çeşitli marketlerde taze olarak
tüketime sunulan, her bir satış noktasından 10’ar adet olmak üzere toplam 110 adet tavuk kanat
örneği incelendi. Örnekler orijinal ambalajları ile alınarak soğuk zincir altında laboratuara
getirilerek en kısa sürede analiz edilmiştir.
Listeria spp izolasyonu ve identifikasyonu: Örneklerde Listeria spp. varlığı FDA (Food and Drug
Administration) metoduna göre belirlendi. 25 gr örnek 225 ml Buffered Listeria Enrichment
Broth (BLEB, Oxoid, CM 897 Basingstoke, UK) besiyerinde homojenize edilerek 30°C’de 4 saat
inkübe edildi. Daha sonra selektif katkı (Lısterıa Selectıve Enrıchment Supplement, SR0141)
ilave edilerek aynı sıcaklıkta 44 saat inkübe edilmiştir. Bu ön zenginleştirme kültüründen Listeria
Selektive Supplement (Oxoid SR0140) içeren Listeria Selective Agar besiyerine (LSA, Oxoid
CM0856, Basingstoke, UK) sürme yöntemi ile ekim yapıldı. LSA plakları 37°C’de 48- 72 saat
inkübe edildi. İnkübasyon sonrası besiyerinde üreyen 2-3 mm çapında siyahımsı yeşil kahverengi,
siyah zonlu çökük merkezli koloniler Listeria şüpheli koloniler olarak değerlendirilmiştir. Her
petriden tipik en az 5 koloni saflaştırma ve identifikasyon işlemleri için Tryptone Soya Yeast
Extract Agar’a (TSYE, Oxoid PO5050A) sürme yöntemi ile ekim yapılarak 30-37°C’de 24 saat
inkübe edilmiştir. Suşların identifikasyonu için gram boyama, oksidaz, katalaz, metil red, indol,
hareketlilik, karbonhidrat fermentasyon, voges proskauer, nitrat redüksiyon ve CAMP testleri
yapılmıştır (5, 6, 7).
Antimikrobiyal duyarlılık testleri: Elde edilen Listeria monocytogenes izolatlarının antimikrobiyal
duyarlılık testleri Clinical and Laboratory Standards Institute’ne göre disk difüzyon yöntemi ile
yapıldı (8). Aktif izolatlardan Tryptone Soya Agar (TSA, CM0131) besiyerine ekim yapıldı. Tek
kolonilerden serum fizyolojik içinde süspansiyon hazırlandı. Süspansiyon yoğunluğu McFarland
0.5 standardına eşdeğer bulanıklıkta ayarlandı. Steril eküvyon ile yüzeye yayma yöntemiyle
%5 koyun kanı içeren Muller-Hinton agara ekim yapıldı. Her bir plaka 4’er antibiyotik disk
yerleştirildi. Plaklar 35°C’de, 24 saat inkübe edildi. İnkübasyondan sonra plaklardaki inhibisyon
zonları ölçülerek dirençli, orta ve duyarlı olarak kaydedildi. Antibiyotik disklerin kalite kontrolü
için referans suş olarak S. aureus ATCC 25293 kullanıldı. Antimikrobiyal duyarlılık test
sonuçları CLSI’nın Staphylococcus spp ve EUCAST’ın Listeria monocytogenes için önerdiği
aralıklara göre değerlendirildi (8,9). Antimikrobiyal duyarlılık testleri için gentamisin (10µg),
tetrasiklin (30µg), eritromisin (15µg), rifampin (5µg), siprofloksasin (5µg), penisilin
(10 U/IE), sefotaksim (30µg), ampisilin (10µg), amikasin (30µg) trimetoprim/
sulfametoksazol (1.25/23.75µg) meropenem (10µg) ve kloramfenikol (30µg) olmak
üzere toplam 12 antibiyotik kullanıldı.
Bulgular
İncelenen 110 adet örnekten toplam 78 adet izolat elde edildi. Yapılan identifikasyon testleri
sonucunda izolatların 65 (%83,3) adeti Listeria monocytogenes olarak belirlendi. İzolatlardaki
Listeria monocytogenes dağılımı Tablo 1’de verilmiştir.
Elde edilen Listeria monocytogenes izolatlarının 3’ü (4.61) gentamisin, 4’ü (6.15)
tetrasiklin, 23’ü (35.38) eritromisin, 5’i (7.69) rifampin, 11’i (16.92) siprofloksasin,
53’ü (81.53) penisilin, 15’i (23.07) sefotaksim, 6’sı (9.23) ampisilin, 25’i (38.46)
amikasin, 49’u (75.38) trimetoprim/sulfametaksazol, 38’i(58,46) meropenem ve 5’i
87