полнотекстовый ресурс

Фиксация формальдегида коллагеном и другими белками 325
2. ФИКСАЦИЯ ФОРМАЛЬДЕГИДА КОЛЛАГЕНОМ
И ДРУГИМИ БЕЛКАМИ
Упомянутые выше атомные группировки реагируют с формальдегидом
такж е и в том случае, когда они составляют часть белковой
молекулы.
Рассм атривая связывание НСНО, прежде всего необходимо остановиться
на вопросе о методах определения количества связанного
ф ормальдегида, а такж е на влиянии различных факторов
на процесс его фиксации.
Чтобы определить количество НСНО, связанного белком, исследуемый
образец обрабаты вается кипящей сильной кислотой. В этих
условиях основная масса формальдегида отщепляется, и он отгоняется
с водяным паром или путем перегонки раствора и улавливается
в сосуде с водой. Д л я устранения испарения Н СНО из
водного раствора к нему в некоторых случаях добавляю т бисульфит
натрия для образования альдегид-бисульфитного соединении
по следующей реакции:
7 т
Н - С С + N aH SO B— *-Н - C f - ОН
Х Н \S O .N a .
Отогнанный формальдегид определяется путем титрования в щелочной
среде иодометрическим методом по следующему уравнению:
НСНО + J 2 + Н 20 = * 2 H J + НСООН.
Особенно точные результаты получаются при осаждении НСНО
димедоном [11]. Осадок высушивается и взвешивается [12].
Количество фиксированного формальдегида часто выражают
в процентах от веса или в миллимолях на 1 г белка. Однако закономерности
связывания НСНО становятся значительно более наглядными,
если произвести расчет количества связанных молекул формальдегида
в процентах от числа аминокислотных звеньев в структуре
белка.
Средний вес такого звена в структуре коллд^ена равен 93,3 единицы
молекулярного веса [6].
Допустим, что с коллагеном связано 2% НСНО. Это значит, что
общий вес молекул формальдегида, фиксированных участком структуры
коллагена с молекулярным весом 100 000, состоящим из
1064 аминокислотных остатков, будет равен 2000 (единиц молекулярного
веса). Так как молекулярный вес НСНО равен 30, нетрудно
подсчитать, что всего указанный участок структуры коллагена
связал 2000 : 30 = 67 молекул альдегида, то есть (67 • 100) : 1064 =
= 6,3% от числа аминокислотных остатков. Такой метод выраже-