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522AGUADO, M.J. et al.de yema de huevo-trealosa (López, et al., 1997).Esto nos ha inducido a determinar la fertilidad obtenidatras conservar el semen en refrigeración durante24 horas, ya que una fertilidad aceptable proporcionaríaun amplio margen de tiempo entre la recogidade semen y la IA.MATERIAL Y METODOSSemenEl semen fue obtenido mediante vagina artificial,a partir de 4 moruecos adultos de raza Manchegapertenecientes al Esquema de Selección de dicharaza y de fertilidad probada. Cada eyaculado fuedividido en dos alícuotas de igual volumen, a cadauna de las cuales se adicionó un diluyentes diferentehasta alcanzar una concentración de 1600x10 6espermatozoides/ml: uno a base de leche descremada(L) (Colas et al., 1968) y otro a base de tristrealosa-yemade huevo (T) (Aisen et al., 1995). Eneste último caso se modificó la fracción hipertónicadel diluyente eliminando el glicerol, adicionándoselas dos fracciones simultáneamente. A continuaciónlas muestras fueron contrastadas, incluyendo ladeterminación de los siguientes parámetros: motilidadindividual (MI) y calidad del movimiento (enescala de 0 a 5), integridad acrosomal (PIA) y porcentajede células con respuesta positiva al test deendósmosis celular (E+). La refrigeración desde30 o C hasta 5 o C se llevó a cabo en 2 horas y el envasadoen pajuelas de 0,25 ml se realizó 2 horas mástarde. Las pajuelas se mantuvieron a 5 o C en la oscuridadun total de 24 horas. Una nueva contrastaciónse realizó al final del periodo de refrigeración.OvejasSe emplearon un total de 40 ovejas adultas deraza manchega, todas ellas paridas hacía más de 4meses. Se distribuyeron en dos lotes homogéneosen cuanto a edad, peso vivo y condición corporal, yse sincronizaron con esponjas de 40 mg de FGAdurante 13 días, y una inyección de 480 UI de eCGen el momento de la retirada de la esponja.Inseminación artificial (IA)Las ovejas fueron inseminadas una sola vez a las55±1 horas de la retirada de las esponjas, aplicando400 millones de espermatozoides por animal. Encada uno de los dos lotes se empleó un diluyentediferente (L o T), distribuyendo los machos deforma equilibrada entre los dos lotes. La IA se llevóa cabo a primeros del mes de junio.Análisis estadísticoEl análisis de los datos de fertilidad se realizómediante el test de Chi cuadrado. Los parámetrosseminales se estudiaron mediante un análisis devarianza, empleando el paquete estadístico SAS.RESULTADOS Y DISCUSIÓNParámetros seminalesEn la Tabla 1 se han recogido los parámetrosseminales determinados durante el periodo de conservacióndel semen en refrigeración. Como puedeapreciarse, se observa con el tiempo un descensomoderado de todos los parámetros seminales analizados.La MI desciende, después de 24 horas, alrededorde un 20% respecto a su valor inicial; el movimientotiende a ser más oscilatorio, pasando de másde 4 a cerca de 3,5; el PIA sufre un descenso significativamentemayor (p