MDCK-MRP2 - Dkfz

Forschungsschwerpunkt A
Zell- und Tumorbiologie
Diese Ergebnisse legen eine wichtige Funktion des Glukokortikoidrezeptors
in der Regulation des Größenwachstums
nahe. Interessanterweise erfolgt die Hemmung des Wachstums
nicht in der dimerisierungsdefekten Glukokortikoidrezeptor-Mutante.
Detaillierte Analyse der Rolle des Rezeptors
in der Wachstumsregulation zeigt, daß der Rezeptor
als Co-Aktivator für Stat5 wirkt, ohne DNA binden zu müssen.
Weiter führt Verlust des Glukokortikoidrezeptors in
der Leber zur schweren Hypoglykämie in experimentell gesetztem
Diabetes. Diese Beobachtungen weisen auf einen
wichtigen Beitrag der Glukokortikoid-abhängigen Genexpression
in der Entwicklung der diabetischen Stoffwechsellage
hin [28]. In Zusammenarbeit mit der Gruppe von
U. Schibler, Universität Genf, konnten wir zeigen, daß Glukokortikoide
und der Rezeptor an der Regulation der
circadianen Uhr [29] sowie bei der Regulation der Brustdrüse
(T. W intermantel, eingereicht) beteiligt sind.
Um zellspezifische Inaktivierung des Östradiolrezeptors zu
erreichen, wurde Exon 3 durch Insertion von loxP-Sequenzen
markiert [30]. Mit Hilfe dieser Mutante haben wir das
Gen für den Rezeptor in der Brustdrüse und im zentralen
Nervensystem inaktiviert (T. Wintermantel, unveröffentlicht).
Verlust des Östradiolrezeptors in epithelialen Zellen
der Brustdrüse führt zu einer verzögerten Brustdrüsenentwicklung.
Inaktivierung des Östradiolrezeptors im Gehirn
wird uns wichtige Hinweise über die zentrale Steuerung
der ovariellen Funktion geben.
Um die Funktion des Mineralokortikoidrezeptors (MR) in vivo
verstehen zu lernen, haben wir das Gen inaktiviert. MR
Knockout-Mäuse sterben etwa 10 Tage nach der Geburt
und zeigen verminderte Amilioride-sensitive Natrium-Rückresorption.
Um die Funktion besser verstehen zu lernen,
haben wir ein konditionales MR-Allel erzeugt (MRflox ). Durch
Expression der Cre-Rekombinase wurde eine Mutation im
Hippocampus entwickelt. Diese Tiere zeigen eine stark verminderte
Gedächtnisleistung (S. Berger, unveröffentlicht).
Mit diesen Mutanten konnte zum ersten Mal eine Funktion
des Mineralokortikoidrezeptors im Hippocampus gezeigt
werden. Wie der Mineralokortikoidrezeptor mit dem Glukokortikoidrezeptor
im Hippocampus zusammenwirkt, wird
eine wichtige Frage für zukünftige Arbeiten sein.
Publikationen (* = externer Koautor)
[1] Bleckmann, S., Blendy, J.A., Rudolph, D., Monaghan, A.P.,
Schmid, W., and Schütz, G. (2002). ATF-1 and CREB are important
for cell survival during early mouse development. Mol. Cell.
Biol. 22, 1919-1925.
[2] Casanova, E., Fehsenfeld, S., Mantamadiotis, T., Lemberger,
T., Greiner, E., Stewart*, A.F., and Schütz, G. (2001). A
CaMKIIalpha iCre BAC allows brain-specific gene inactivation.
Genesis 31, 37-42.
[3] Balschun*, D., Wolfer*, D.P., Gass, P., Mantamadiotis, T.,
Welzl*, H., Schütz, G., Frey*, J.U., and Lipp*, H.-P. (2003). Does
CREB have a pivotal role in hippocampal synaptic plasticity and
hippocampus-dependent memory? J. Neurosci. 23, 6304-6314.
[4] Mantamadiotis, T., Lemberger, T., Bleckmann, S., Kern, H.,
Kretz, O., Villalba-Martin, A., Tronche, F., Kellendonk, C., Gau,
D., Kapfhammer*, J., Otto, C., Schmid, W., and Schütz, G.
(2002). Disruption of CREB function in brain leads to
neurodegeneration. Nat. Genet. 31, 47 - 54.
[5] Casanova, E., Lemberger, T., Fehsenfeld, S., Greiner, E., and
Schütz, G. (2002). Rapid localisation of a gene within BACs and
PACs. BioTechniques 32, 240-242.
[6] Casanova, E., Fehsenfeld, S., Greiner, E., Stewart*, A.F.,
and Schütz, G. (2002). Construction of a conditional allele of
RSK-B/MSK2 in the mouse. Genesis 32, 158-160.
Abteilung A020
Molekularbiologie der Zelle I
[7] Casanova, E., Fehsenfeld, S., Greiner, E., Stewart*, A.F.,
and Schütz, G. (2002). Conditional mutagenesis of CamKIV. Genesis
32, 161-164.
[8] Shimshek*, D.R., Kim*, J.H., Hübner*, M.R., Spergel*, D.J.,
Buchholz*, F., Casanova, E., Schütz, G., Stewart*, A.F.,
Seeburg*, P.H., and Sprengel*, R. (2002). Codon-optimized Cre
recombinase expression in the mouse. Genesis 32, 19-26.
[9] Behrens*, A., Sibilia*, M., David*, J.-P., Schütz, G., and
Wagner*, E.F. (2002). Impaired postnatal hepatocyte proliferation
and liver regeneration in mice lacking c-jun in the liver. EMBO
J. 21, 1782-1790.
[10] Coffinier*, C., Gresh*, L., Fiette*, L., Tronche, F., Schütz,
G., Babinet*, C., Pontoglio*, M., Yaniv*, M., and Barra*, J.
(2002). Bile system morphogenesis defects and liver dysfunction
upon targeted deletion of HNF1beta. Development 129, 1829-
1838.
[11] Beißbarth, T., Borisevich, I., Hörlein, A., Kenzelmann, M.,
Hergenhahn, M., Klewe-Nebenius, A., Klären, R., Korn, B.,
Schmid, W., Vingron, M., and Schütz, G. (2003). Analysis of
CREM-dependent gene expression during mouse spermatogenesis.
Mol. Cell. Endocrinol. 212, 29-39.
[12] Gau, D., Lemberger, T., von Gall, C., Kretz, O., Le Minh*, N.,
Gass, P., Schmid, W., Schibler*, U., Korf*, H.W., and Schütz, G.
(2002). Phosphorylation of CREB Ser-142 regulates light-induced
phase shifts of the circadian clock. Neuron 34, 245-253.
[13] Otto, C., Kovalchuk*, Y., Wolfer*, D.P., Gass, P., Martin*,
M., Zuschratter*, W., Gröne, H.-J., Kellendonk, C., Tronche, F.,
Maldonado*, R., Lipp*, H.-P., Konnerth*, A., and Schütz, G.
(2001). Impairment of mossy fiber long-term potentiation and
associative learning in pituitary adenylate cyclase activating
polypeptide type I receptor-deficient mice. J. Neurosci. 21,
5520-5527.
[14] Otto, C., Martin*, M., Wolfer*, D.P., Lipp*, H.-P.,
Maldonado*, R., and Schütz, G. (2001). Altered emotional behavior
in PACAP-type-I-receptor-deficient mice. Mol. Brain Res.
92, 78-84.
[15] Reichardt, H.M., Tronche, F., Berger, S., Kellendonk, C., and
Schütz, G. (2000). New insights into glucocorticoid and mineralocorticoid
signalling - lessons from gene targeting. In Hormones &
Signalling, Advances in Pharmacology 47 (ed. B. O´Malley), Volume
47, B. O´Malley, ed. (San Diego: Academic Press), pp. 1-21.
[16] Schulz-Baldes*, A., Berger, S., Grahammer*, F., Warth*, R.,
Goldschmidt*, I., Peters*, J., Schütz, G., Greger*, R., and
Bleich*, M. (2001). Induction of the epithelial NA+ channel via
glucocorticoids in mineralocorticoid receptor knockout mice.
Pflüger´s Arch. Eur. J. Histol. 443, 297-305.
[17] Reichardt, H.M., Kaestner, K.H., Wessely, O., Tuckermann,
J., Angel, P., Kretz, O., Bock*, R., Schmid, W., Herrlich*, P., and
Schütz, G. (1998). DNA binding of the glucocorticoid receptor is
not essential for survival. Cell 93, 531-541.
[18] Reichardt, H.M., Tuckermann, J.P., Göttlicher*, M., Vujic, M.,
Weih*, F., Angel, P., Herrlich*, P., and Schütz, G. (2001). Repression
of inflammatory responses in the absence of DNA-binding by
the glucocorticoid receptor. EMBO J. 20, 7168-7173.
[19] Reichardt, H.M., Umland, T., Bauer, A., Kretz, O., and
Schütz, G. (2000). Mice with an increased glucocorticoid receptor
gene dosage show enhanced resistance to stress and endotoxic
shock. Mol. Cell. Biol. 20, 9009-9017.
[20] Kenzelmann, M., Klären, R., Hergenhahn, M., Bonrouhi, M.,
Gröne, H.-J., Schmid, W., and Schütz, G. (2003). High accuracy
amplification of nanogram total RNA amounts for gene profiling.
Genomics 83, 550-558.
[21] Limbourg*, F.P., Huang*, Z., Plumier*, J.-C., Simoncini*, T.,
Fujioka*, M., Tuckermann, J., Schütz, G., Moskowitz*, M.A., and
Liao*, J.K. (2002). Enhancement of cerebral blood flow and
stroke protection mediated by non-nuclear actions of the glucocorticoid
receptor. J. Clin. Invest. 110, 1729-1738.
[22] Tronche, F., Kellendonk, C., Reichardt, H.M., and Schütz, G.
(1998). Genetic dissection of glucocorticoid receptor function in
mice. Curr Opin Genet Dev 8, 532-538.
DKFZ 2004: Wissenschaftlicher Ergebnisbericht 2002 - 2003
27