MDCK-MRP2 - Dkfz

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Forschungsschwerpunkt A
Zell- und Tumorbiologie
Amyloid Aβ Homodimere erleichtern die Fibrillenbildung
und erlauben die Herstellung konformationsspezifischer
Antikörper mit Aβ Dimeren als Antigen
Zusammenarbeit FU Berlin, Inst. Für Biochemie, Gerd Multhaup.
Die Entstehung des Aβ Peptids aus dem Vorläuferprotein
APP stellt einen ersten Schritt der Pathogenese dar, die
schliesslich mit der Bildung der für die Alzheimer Krankheit
typischen Plaques endet. Lösliche Aβ Oligomere, die auch
innerhalb von neuronalen Zellen vorkommen, sind bereits
als Dimere stabil und finden sich als SDS-stabile Dimere in
humanem Hirngewebe. Die Umwandlung des Aβ in fibrilläre
Aggregate ist ein energetisch und strukturell weitgehend
unverstandener Prozess. Deshalb haben wir spektroskopische
Untersuchungen mit dimeren Aβ Peptiden durchgeführt.
Das dimere Peptid Aβ42 zeigte gegenüber dem Monomer
eine ausgeprägte β-Faltblatt Struktur. Der Anteil der
über eine Schwefelbrücke erzeugten Dimere war doppelt
so hoch wie der von monomeren Formen. Die zusätzlichen
Reste Ile-41 und Ala-42 des Aβ42 trugen etwa 30% zum
β-Faltblattanteil bei.
Obwohl das nach α- und γ-Sekretase Spaltung entstehende
p3 Fragment in frühen Plaques gefunden wird, konnte hier
die erzwungene Dimerisierung keine Verstärkung der β-
Faltblattstruktur induzieren. Im Gegensatz zum Aβ bildeten
sich aus dem dimeren Peptid p3/17-42 kleinere granuläre
Partikel als aus dimeren p3/40 Peptiden. Die durchschnittliche
Länge der aus p3/17-42 Peptiden gebildeten Fibrillen
betrug 2,5µm. Die Untersuchung dimerer Peptide ist wichtig,
da Dimere einen Aggregationskeim darstellen, der
schliesslich zur Plaquebildung führt. Ausserdem ist es uns
gelungen, mit den beschriebenen dimeren Aβ Peptiden
polyklonale Antikörper herzustellen, die konformationsspezifisch
sind und preferentiell die β-Faltblattstruktur erkennen.
Diese Antikörper könnten damit in monoklonaler Form
als diagnostisches und therapeutisches Werkzeug dienen.
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