MDCK-MRP2 - Dkfz
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Forschungsschwerpunkt E<br />
Innovative Krebsdiagnostik und -therapie<br />
Rekombinante Antikörper (E130)<br />
Leiter: Prof. Dr. Melvyn Little<br />
Postdocs<br />
Dr.rer.nat. Marike J.J.G. Stassar (-9/02)<br />
Dr.rer.nat. Björn Cochlovius (-9/02)<br />
Dr.med. Jana Schlenzka (1/02-)<br />
Dipl.Chem. Karin Hoffmann (8/02-)<br />
Doktorandin<br />
Dipl.-Biol. Alexandra Bähre<br />
Experimentelle Therapie mit rekombinanten<br />
Antikörpern<br />
1) Screening von Antikörperbibliotheken gegen<br />
Antigene auf der Oberfläche von kolorektalen<br />
Karzinomen<br />
K. Hoffmann, M. von Knebel-Doeberitz, M. Little<br />
Unsere aus menschlichem Blut hergestellten hochkomplexen<br />
Immunglobulin-Genbanken oder „synthetische“ humane<br />
Immunglobulin-Genbanken mit Zufallssequenzen an der<br />
Antigenbindungsstelle dienen als Repertoir für die Isolation<br />
klinisch relevanter Antikörper. Spezifische Antikörper<br />
werden mit der Phage-Display-Technologie aus der Bibliothek<br />
selektioniert. Wir haben damit die Möglichkeit, humane<br />
monoklonale Antikörper in vitro, d.h. ohne die Notwendigkeit<br />
zur Immunisierung, herzustellen. Mit dieser<br />
Technologie ist es uns gelungen, humane Antikörper gegen<br />
Antigene auf der Oberfläche von kolorektalen Karzinomen<br />
zu gewinnen.<br />
2) Mulitivalente rekombinante Antikörper<br />
B. Cochlovius, M. Little<br />
In Zusammenarbeit mit: Dr. Gerd Moldenhauer, DKFZ<br />
Um eine höhere Avidität und eine längere in vivo Retentionszeit<br />
zu erreichen, haben wir einen tetravalenten<br />
bispezifischen „Tandem Diabody“ konstruiert. In vivo Versuche<br />
mit dieser innovativen Form eines rekombinanten<br />
Antikörpers zeigten klarer Vorteile gegenüber den kleineren<br />
herkömmlichen bivalenten Diabodys. Wir konnten z.B.<br />
eine komplette Heilung eines menschlichen Burkitt<br />
Lymphoms in einem SCID Mausmodell erreichen [1, 6].<br />
3) Entwicklung von Tumorvakzinen<br />
Geeignete Tumorantigene für eine Immuntherapie wurden<br />
untersucht. Für die Entwicklung von oralen Tumorvakzine<br />
wurde die DNA eines Tumorantigens und dendritische<br />
Zellen verwendet. Die dendritischen Zellen wurden<br />
mit dem genetischen Material einer Tumorprobe transfiziert,<br />
um die effiziente Präsentation des Tumorantigens zu ermöglichen.<br />
Krebsspezifische T Zell Antworten konnten auch<br />
mit mRNA-transfizierten dendritischen Zellen erzielt werden<br />
[2, 3, 5].<br />
E130<br />
Rekombinante Antikörper<br />
4) Immunosuppression<br />
Um die Nebenwirkungen des OKT3-Antikörpers bei der<br />
Behandlung von Patienten nach einer Transplantation zu<br />
vermeiden, wurde die bindenden Domänen des Antikörpers<br />
mit den konstanten Domänen eines humanen IgM-<br />
Antikörpers fusioniert. Dieser neuartige Antikörper konnte<br />
die Aktivierung von T Lymphozyten durch seine Bindung<br />
an CD3 des T Zell-Rezeptor-Komplexes effizient inhibieren<br />
[4].<br />
Zusatzfinanzierung: BMBF (2 Wissenschaftler), Mildred Scheel<br />
Stiftung (1 Wissenschaftler), Stipendium des Graduierten Kollegs<br />
für Biotechnologie der Univ. Heidelberg (1 Doktorandenstelle).<br />
Publikationen (* = externer Koautor)<br />
[1] Kipriyanov SM*, Cochlovius B, Schafer HJ*, Moldenhauer G,<br />
Bahre A, Le Gall F*, Knackmuss S*, Little M. Synergistic antitumor<br />
effect of bispecific CD19 x CD3 and CD19 x CD16 diabodies<br />
in a preclinical model of non-Hodgkin’s lymphoma. J Immunol 69:<br />
137-44 (2002).<br />
[2] Kubuschok B*, Schmits R*, Hartmann F*, Cochlovius B, Breit<br />
R*, Konig J*, Pistorius G*, Schilling M*, Renner C*,<br />
Pfreundschuh M*. Use of spontaneous Epstein-Barr viruslymphoblastoid<br />
cell lines genetically modified to express tumor<br />
antigen as cancer vaccines: mutated p21 ras oncogene in pancreatic<br />
carcinoma as a model. Hum Gene Ther. 13: 815-27<br />
(2002).<br />
[3] Schmits R*, Cochlovius B, Treitz G*, Regitz E*, Ketter R*,<br />
Preuss KD*, Romeike BF*, Pfreundschuh M*. Analysis of the antibody<br />
repertoire of astrocytoma patients against antigens expressed<br />
by gliomas. Int J Cancer. 98: 73-7 (2002).<br />
[4] Choi I, Schmitt WE, Bahre A, Little M, Cochlovius B. Recombinant<br />
chimeric OKT3/IgM antibodies for immune suppression:<br />
evaluation in a human CD3 transgenic mouse model. Immunol<br />
Lett. 80: 125-8 (2002).<br />
[5] Cochlovius B, Stassar MJ, Schreurs MW, Benner A, Adema<br />
GJ. Oral DNA vaccination: antigen uptake and presentation by<br />
dendritic cells elicits protective immunity. Immunol Lett. 80: 89-96<br />
(2002).<br />
[6] Kipriyanov SM, Moldenhauer G, Braunagel M, Reusch U*<br />
Cochlovius B, Le Gall F, Kouprianova OA, Von der Lieth CW, Little<br />
M. Effect of domain order on the activity of bacterially produced<br />
bispecific single-chain Fv antibodies. J Mol Biol. 330: 99-111<br />
(2003).<br />
DKFZ 2004: Wissenschaftlicher Ergebnisbericht 2002 - 2003<br />
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