MDCK-MRP2 - Dkfz

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Forschungsschwerpunkt A
Zell- und Tumorbiologie
Räumliche Organisation der Signaltransduktion
V. Becker, U. Baumann, U. Klingmüller
In Zusammenarbeit mit S. Kuppig (Max-Planck-Institut für
Immunbiologie, Freiburg)
Um die räumliche Anordnung von Signalübertragungskomplexen
und deren Veränderung als Folge der EpoR-Aktivierung
sichtbarzumachen, haben wir Fusionsproteine zwischen
grün fluoreszierendem Protein (GFP) und EpoR hergestellt.
Die biochemische und funktionelle Charakterisierung dieser
Fusionsproteine ergab, daß fluoreszenzmarkierte EpoRs
in ihrer biologischen Kompetenz nicht beeinträchtigt sind
[2]. Durch genetischen knock-in in embryonalen Stammzellen
sind wir dabei diese Moleküle in der Maus zu exprimieren.
Außerdem werden Methoden im Labor etabliert, die räumliche
Annährung von Proteinen durch Fluorescence Resonance
Energy Transfer (FRET) in lebenden Zellen zu quantifizieren.
Publikationen (* = externe Koautoren)
[1] R. Ketteler, *S. Glaser, O. Sandra, *U. M. Martens, and U.
Klingmüller. Enhanced transgene expression in primitive hematopoietic
progenitor cells and embryonic stem cells efficiently transduced
by optimized retroviral hybrid vectors. Gene Therapy 9
(2002) 477-487.
[2] R. Ketteler, A. C. Heinrich, J. K. Offe, V. Becker, *J. Cohen,
*D. Neumann, and U. Klingmüller. A Functional GFP-Tagged
Erythropoietin Receptor Despite Separation of JAK2 Binding Sites
and Tyrosine Residues. J. Biol. Chem. 277 (2002) 26547-26552.
A150
Systembiologie der Signaltransduktion
Abbildung 1: Mathematische Modellierung der JAK-STAT Signalkaskade. Durch mathematische Modellierung experimenteller Daten
konnte das zyklische Verhalten von STAT5 identifiziert werden, das durch weitere Experimente bestätigt werden konnte.
DKFZ 2004: Wissenschaftlicher Ergebnisbericht 2002 - 2003
[3] R. Ketteler, C. Moghraby, J. G. Hsiao, O. Sandra, *H. F.
Lodish and U. Klingmüller. The cytokine-inducible SH2 domain containing
protein CIS negatively regulates signaling by promoting
apoptosis in erythroid progenitor cells. J. Biol. Chem. 278 (2002)
2654-60.
[4] I. Swameye, *T. G. Müller, *J. Timmer, O. Sandra, and U.
Klingmüller. Identification of nucleocytoplasmic cycling as a remote
sensor in cellular signalling by data-based dynamic modeling.
Proc. Natl. Acad. Sci. USA 100 (2003) 1028-33.
[5] *J. Cohen, *L. Oren-Young, U. Klingmüller, and *D.
Neumann. Protein tyrosine phosphatase 1B particitpates in
down-regulation of erythropoietin receptor signaling. Biochem J.
15 (2004) 517-24.
[6] *T. G. Müller, I. Swameye, O. Sandra, U. Klingmüller, and *J.
Timmer. (2004). Tests for cycling in a signalling pathway. In press
in Journal of the Royal Statistical Society: Series C (Applied Statistics).
[7] *D. Faller, U. Klingmüller, and *J. Timmer. (2004) Simulation
methods for optimal experimental design in systems biology. In
press in Simulation: Trans. Soc. Modeling Computer Simulation.
[8] *J. Timmer, *T. G. Müller, I. Swameye, O. Sandra, and U.
Klingmüller. Modeling the non-linear dynamics of cellular signal
transduction. (2004). In press in International Journal of Bifurcation
and Chaos.
[9] *W. Ruan, V. Becker, U. Klingmüller, and *D. Langosch.
(2004). The interface between self-assembling erythropoietin
receptor transmembrane segments corresponds to a membranespanning
leucine zipper. In press in J. Biol. Chem.
[10] A. C. Heinrich, *R. Pelanda, and U. Klingmüller. (2004). A
Mouse Model for Visualization and Targeted Mutations in the
Erythroid Lineage. Blood 104(3) (2004) 659-666.