MDCK-MRP2 - Dkfz

358
Forschungsschwerpunkt E
Innovative Krebsdiagnostik und -therapie
das native bzw. das denaturierte Protein gerichtet sind.
Mit diesen Antikörpern werden derzeit die Expressionsmuster
des Transgenprodukts getestet.
Da E2 für die Virusaktivierung essentiell ist, wollen wir in
doppelt transgenen Mäusen dieses Phänomen weiter untersuchen,
hierzu müssen doppelttransgene Tiere gezüchtet
werden, die HPV-11 E2 und das o.g. Reportergen tragen.
Studien zur Neurodegenration
In Kooperation mit J. Vogel und M. Weigand
Mehrere Vorhaben beschäftigen sich mit den (molekularen)
Folgen verschiedener neurodegenerativer Erkrankungen,
die im Tiermodell simuliert werden. Zentrale Rolle spielt
dabei die Aktivierung des c-Jun Transkriptionsfaktors, den
wir mit verschiedenen transgenen Mausmodellen untersuchen.
Da eine Inaktivierung von c-Jun zur Letalität führt,
nutzen wir konditionale Modelle sowie Tiere, deren Transgen
c-Jun indirekt beeinflußt. Vermutlich gibt es ein Gleichgewicht
zwischen c-Jun und den Proteinen, die dessen
Expression und Aktivierung beeinflussen können. Kommt
es hier zu Verschiebungen, so verändert sich das Ausmaß
des neurodegenrativen Ereignisses [22].
Neue transgene Tiermodelle
in Kooperation mit R. Jäger, A. Mohr und R. Zwacka
Um den experimentellen Nachweis der Beteiligung von
Caspasen an der Apoptose im Brustepithel während der
verschiedenen Phasen der Brustdrüsenentwicklung, insbesondere
der postlaktationalen Involution zu erbringen wurden
transgene Tiere generiert, die den Breitband-Caspasen-
Inhibitor p35 aus Baculovirus unter der Kontrolle des Brustdrüsenspezifischen
WAP-Promoters exprimieren. Aus fünf
transgenen Founderlinien zeigt eine stärkere Transgenexpression,
sie dient den genannten Experimenten. Da nicht
alle Apoptosetypen durch Bcl-2 unterdrückt werden können,
sollen die Tiere auch mit den bereits publizierten WAPbcl-2-Transgenen
verglichen werden (Jäger et al., 1997
Oncogene 15: 1787-1795 ).
Caspase-8L ist eine anti-apoptotisch wirkende Splicevariante
der Caspase-8. Sie ist vor allem in haematopoetischen
Stammzellen exprimiert und wirkt dort als Schutzmechanismus,
der diese Zellen vor dem Zelltod bewahrt. Während
der Differenzierung in der Haemtopoese schalten die
Zellen auf Caspase-8 um und können so wieder über Apoptose
reguliert werden. Zur Überprüfung, ob eine fehlerhafte,
andauernde Expression von Caspase-8L an der Pathogenese
von lymphoproliferativen Krankheiten beteiligt ist,
haben wir eine transgene Maus generiert die Caspase-8L
in T-Zellen überexprimiert.
Um ein Tiermodell für das anaplastische Lymphom zu schaffen,
wurden transgene Mäuse generiert, die das beteiligte
Onkogen p80 (ein aus einer Chromosomentranslokation
resultierendes Fusionsprotein aus Nucleophosmin und der
ALK-Kinase) unter der Kontrolle des thymocyten-spezifischen
lck-Promoters tragen. Von sechs Foundertiere fielen
drei durch ungewöhnliches Größenwachstum auf. Eines
verstarb an multiplen Lymphomen, die beiden übrigen Tiere
aus nicht geklärter Ursache (keine Tumoren). Es gelang
nicht, aus den Foundertieren transgene Linien zu etablieren.
Der Transkriptionfaktor TCF/LEF ist hyperaktiv in vielen
Kolorektalkarzionomen. Dies liegt an häufig auftretenden
Mutationen im APC - (adenomatous polyposis coli) Gen,
welches normalerweise β-Catenin negativ reguliert. Mutiertes
APC ist dazu nicht mehr in der Lage und es kommt zur
Akkumulation von β-Catenin, das wiederum an TCF/LEF
Klinische Kooperationseinheit E160
Molekulare Hämatologie/Onkologie
DKFZ 2004: Wissenschaftlicher Ergebnisbericht 2002 - 2003
bindet und dadurch seine Aktivität als Transkriptionsfakor
erhöht. Dieser Prozess ist an der Krebsentstehung beteiligt.
Um die Prozesse und mögliche Interventionsmöglichkeiten
im Tiermodel untersuchen zu können haben wir eine TCF/
Lef-1 Reportermaus generiert.
Publikationen (* = externer Koautor)
[1] T. Luft, M. Moos, H. Goldschmidt, A.D. Ho* and M. Görner.
Dissociation of putative graft-versus-hematopoiesis and graftversus-myeloma
effects in patients with rapidly progressive multiple
myeloma. Br J Haematol. 2003 Nov;123(4):646-53
[2] Luft, T., Jefford, M., Luetjens, P., Toy, T., Hochrein, H.,
Masterman, KA., Maliszewski, C., Shortman, K., Cebon, J., and
Maraskovsky, E. Functionally distinct DC populations induced by
physiologic stimuli: Prostaglandin E (PGE ) regulates the migra-
2 2
tory capacity of specific DC subsets. Blood 2002, 100(4): 1362-
72, BMN evaluation: e**
[3] Luft, T., P. Luetjens, H. Hochrein, K. Shortman, F.
Masterman, M. Rizkalla, C. Maliszewski, J. Cebon, and E.
Maraskovsky. Interferon-alpha (IFN-a) enhances CD40L-mediated
activation of immature McDC. Int Immunol. 2002 Apr
14(4):367-80.
[4] Luft, T., M. Jefford, P. Luetjens, H. Hochrein, K. Masterman,
C. Maliszewski, J. Cebon, and E. Maraskovsky. IL-1b enhances
CD40L-mediated cytokine secretion by human Dendritic Cells (DC)
- a mechanism for T cell independent DC activation. J Immunol.
2002 Jan15; 168(2):2529-37.
[5] Luft T, Mark Rizkalla, Tsin Yee Tai, Qiyuan Chen, Roderick I.
McFarlan*, Ian D. Davis, Eugene Maraskovsky and Jonathan
Cebon. Exogenous peptides presented by TAP-deficient and
TAP-competent cells: Intracellular loading and kinetics of presentation.
J Immunol. 2001 Sep 1;167(5):2529-37.
[8] *M. Jefford, *M. Schnurr, *T. Toy, *K.A. Masterman, *A.
Shin, *T. Beecroft, *T. Yee Tai, *K. Shortman, *M.
Shackleton,*I. D. Davis, *P. Parente, T. Luft, *W. Chen, *J.
Cebon and *E. Maraskovsky: Functional comparison of DC generated
in vivo with Flt3 ligand or in vitro from blood monocytes:
Differential regulation by specific classes of physiologic stimuli.
Blood. 2003 Sep 1;102(5):1753-63
[9] M. Görner, R. Weber-Nordt, S. Höpfner, A. Benner, T. Luft,
*A.D. Ho: Addition of a low fixed number of CD3+ cells to CD34enriched
allografts: Effects on engraftment, GvHD and survival
after related and unrelated peripheral stem cell transplantation.
J Hematother Stem Cell Res. 2003 Jun;12(3):309-20
[10] Görner, M., Kordelas, P., Thalheimer, M., Luft, T., Pfeiffer,
S., Ustaoglu, F., Punzel, M., Weber-Nordt, R., Moos, M.,
Goldschmidt, H., Ho, AD. Stable mixed chimerism after T cell-depleted
allogeneic hematopoietic stem cell transplantation using
conditioning with low-dose total body irradiation und fludarabin.
Bone Marrow Transplant. 2002 Apr, 29(7):621.4.
[11] Munder, M., *E. Bettelli, *L. Monney,* J.M. Slavik, *L.B.
Nicholson, and *V.K. Kuchroo. Reduced self-reactivity of an
autoreactive T cell after activation with cross-reactive non-selfligand.
J Exp Med 2002 196:1151.
12] *Kuchroo, V.K., *A.C. Anderson, *H. Waldner, M. Munder,
*E. Bettelli, and *L.B. Nicholson. 2002. T cell response in experimental
autoimmune encephalomyelitis (EAE): role of self and
cross-reactive antigens in shaping, tuning, and regulating the
autopathogenic T cell repertoire. Annu Rev Immunol 2002
20:101.
[13] Munder M, Mallo M, Eichmann K, Modolell M. Direct stimulation
of macrophages by IL-12 and IL-18 - a bridge built on solid
ground. Immunol Lett. 2001 Jan 1; 75(2): 159-60.
[14] Marti, A., Ritter, P.M., Jäger, R., Lazar, H., Baltzer, A.,
Schenkel, J., Declerq, W., Vandenabeele, P. and Jaggi, R.:
“Mouse mammary gland involution is associated with cytochrome
c release and caspase activation”, Mech. Develop. 104 (1-2), 89-
98 (2001).