MDCK-MRP2 - Dkfz

Forschungsschwerpunkt A
Zell- und Tumorbiologie
Organisation Internationaler DKFZ Laborkurse
und Symposien auf den Gebieten:
Digitale Mikroskopie und Proben-Detektion in
der Biomedizin
Konzept und Koordination: M.F. Trendelenburg und
H. Spring
M. Marcello, M. Pelajo-Machado, H. Tröster,
L.H. Monteiro-Leal, R. Fischer
In Zusammenarbeit mit: W.W. Franke, H. Herrmann, J. Kartenbeck
, L. Langbein (A010), D. Keppler, A. Nies (A090), P. Lichter,
St. Joos (B060), Th. Bächi (Zürich, Schweiz), H. Bauch, D.
Brocksch, H. Gundlach, R. Käthner, W. Malkusch (Fa. Carl Zeiss),
J.C. Bulinski, M. Sheetz (New York, USA), W. Gräwe, B.
Moomaw, M. Oshiro, N. Sugiyama, L. Schleinkofer, K. Weinbuch
(Fa. Hamamatsu Photonics), W. Ansorge, J. Ellenberg, R.
Pepperkok, E.Stelzer, (EMBL, Heidelberg), R. Leube (Mainz),
S.Terakawa (Hamamatsu, Japan), M. White (Liverpool, UK)
DKFZ Advanced Practical Courses
8. - 12. Oktober 2001: DKFZ-Advanced Course on Digital
Microscopy and Fluorescence Techniques in Cell Biology
(Advanced Digital Microscopy, Green Fluorescent Protein
Technology, Fluorescence Resonance Energy Transfer,
Multifluorescence Microscopy, Confocal Microscopy, Image
Processing, 3-D Procedures, Calcium Imaging, FISH & CHIPS)
7. - 11. Oktober 2002: DKFZ-Advanced Course on Digital
Microscopy and Fluorescence Techniques in Cell Biology
(Advanced Digital Microscopy, Green Fluorescent Protein
Technology, Fluorescence Resonance Energy Transfer,
Multifluorescence Microscopy, Confocal Microscopy, Image
Processing, 3-D Procedures, Calcium Imaging, FISH & CHIPS)
29. September - 3. Oktober 2003: DKFZ-Advanced Course
on Digital Microscopy and Fluorescence Techniques in Cell
Biology (Automated Microscopy, Calcium Imaging,
Evanescence Microscopy (TIRF), Fast Imaging Microscopy,
Fluorescence Resonance Energy Transfer, Green
Fluorescent Protein Technology, Multi Parameter
Fluorescence, 3-D � 4-D)
26. September - 1. Oktober 2004: DKFZ-Advanced Course
on Digital Microscopy and Fluorescence Techniques in Cell
Biology (Automated Microscopy, Calcium Imaging,
Evanescence Microscopy (TIRF), Fast Imaging Microscopy,
Fluorescence Resonance Energy Transfer, Green
Fluorescent Protein Technology, Multi Parameter
Fluorescence, 3-D � 4-D)
EMBO Practical Courses
M.F. Trendelenburg, R. Fischer: Kursteil Microinjection into
Xenopus Oocytes and Eggs.
EMBO Practical Courses on Microinjection and Probe
Detection
EMBL Heidelberg, 18-23 Juni, 2001
EMBL Heidelberg, 26-31 Mai, 2003
H. Spring: Kursteil Fluorescent live cell microscopy
EMBO Practical Course on Confocal and Multi-Photon
Microscopy of Live Specimens
EMBL, Heidelberg; April 16-23,1999
A120
Strukturelle Genanalyse
Biomedizinische Strukturforschung (A120)
Modellsysteme
Amphibien Oocyten und Embryonen
GFP Stabil Transformierte Zell-Linien
Giardia lamblia (Portland strain), ein parasitäres Protozoon.
Injektionsexperimente in Amphibien Oocyten
R. Fischer, M. Marcello, H. Tröster, M.F. Trendelenburg
Mikroinjektionsexperimente viraler und nicht viraler DNA
Proben in Xenopus Oocyten und/oder befruchtete Eizellen
von Xenopus laevis bieten eine Vielfalt experimenteller
Ansätze für detaillierte Untersuchungen zu Transkriptions-Kontrollfaktoren,
Chromatin-Rekonstitution und Gen-
Replikation.
In Zusammenarbeit mit der Gruppe von G. Sczakiel konnten
wir eine neuartige experimentelle Strategie entwikkeln
für den Nachweis einer spezifischen funktionellen Selektion
karyophiler DNA-Cis-Elemente: Hierzu wurde ein Pool
kurzkettiger DNA-Sequenzen mit bekanntem Sequenzgehalt
in Xenopus Oocyten injiziert, inkubiert und die Lokalisation
der injizierten Sequenzen im Zellkern oder
Cytoplasma untersucht. Methodisch wurden die DNA-Sequenzen
durch ein modifiziertes PCR-Verfahren nachgewiesen.
Marcello, M., Fischer, R., Troester, H., Trendelenburg, M.,
Sczakiel, G.,: Selecting karyophilic DNA cis elements in Xenopus
laevis oocytes: a new approach. Int. J. Dev. Biol. 46, 309-316
(2002)
Fluorescence Live Cell Imaging Microscopy
(FLIM): Charakterisierung dynamischer
Prozesse in transformierten Zell-Linien
M. Marcello, H. Spring, R. Fischer, H. Tröster,
M.F. Trendelenburg
In Zusammenarbeit mit: J.C. Bulinski (Columbia University, New
York, USA), Y. Ying, G. Rappold (Humangenetik, Universität
Heidelberg).
Durch die raschen Fortschritte in der Entwicklung von GFPtransformierten
Zelllinien können dynamische Prozesse invitro
analysiert werden: der hierzu verwendete Arbeitsplatz
besteht aus einer hochauflösenden 3 Chip CCD Kamera
in Verbindung mit Fluoreszenzmikroskop, computergesteuertem
Shutter und der COMPIX Image Analysis Software.
Als Zellsystem verwenden wir eine stabil GFP-transformierte
Affennieren-Zelllinie. Nach Inkubation der Zellen
mit Pervanadat oder Methyl-Cyclo-Dextrin (MCD) können
auf diese Weise spezifische Änderungen der Dynamik des
mikrotubulären Systems analysiert werden, welche eine
Analogie zu entsprechenden Prozessen in metastasierenden
Zellen aufweisen.
In einer weiteren Versuchsserie (Kooperation mit dem Institut
für Humangenetik, Universität Heidelberg) wird speziell
die Dynamik des Aktin-Skelettsystems in neuronalen
Zellen analysiert. Von speziellem Interesse ist dabei die Rolle
des Rho GTPase aktivierenden Proteins MEGAP.
DKFZ 2004: Wissenschaftlicher Ergebnisbericht 2002 - 2003
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