APPUNTI DI SEMEIOTICA - Istituto Comprensivo "G. Palatucci"

Giordano Perin; meeting markers tumorali
IL MICRO ARREY:
con questa tecnica è possibile eseguire delle analisi multiple di campioni di RNA
e DNA e, anche se con maggiore difficoltà, PROTEINE. Con una tecnica di
questo tipo è possibile:
eseguire un confronto tra il FENOTIPO DI UNA CELLULA NEOPLASTICA E
QUELLO DI UNA CELLULA NORMALE.
Eseguire un confronto tra il FENOTIPO DI UNA CELLULA DI UN TUMORE
ASPORTATO E DI UNA RECIDIVA O DI UNA METASTASI.
Eseguire un confronto tra una cellula PRELEVATA PRIMA DI UNA TERAPIA
CHEMIOTERAPICA e una PRELEVATA DOPO DI ESSA.
Di fatto rappresenta una RISORSA POTENZIALMENTE ESTREMAMENTE UTILE:
potrebbe aiutare in modo molto significativo a determinare la sensibilità di un
dato tumore ad una data terapia e soprattutto potrebbe aiutare a prevenire la
sensibilizzazione delle cellule tumorali ai chemioterapici.
ESECUZIONE:
• SI ESTRAGGONO DUE CAMPIONI DI RNA CELLULARI e si amplificano
formano del cDNA tramite PCR.
◦ L'RNA viene raccolto:
▪
▪
chiaramente dopo aver isolato le
cellule in fase di analisi.
Grazie ad una soluzione capace di
provocarne la solubilizzazione in
liquido.
◦ L'RNA viene replicato in cDNA tramite
tecniche di POLIMERASE CHAIN
REACTION:
▪
▪
si sfruttano dei primers di POLI T
compatibili con le code di POLI A
caratteristiche di tutti gli RNA
MESSAGGERI PRODOTTI DAL
NOSTRO ORGANISMO.
Si esegue un certo numero di cicli di
modo da ottenere una discreta
quantità di materiale: i due campioni
vengono sottoposti, ovviamente, al
medesimo numero di cicli.
◦ Grazie a coloranti specifici SI
COLORANO DIFFERENTEMENTE I
CAMPIONI PROVENIENTI DALL'UNA E
DALL'ALTRA CELLULA, generalmente si
utilizzano dei fluorocromi associati a
sostanze che si intercalano nella doppia
elica del DNA neoformatosi.
• Si pone il campione preparato sul CHIP DI
ANALISI, tale chip risulta ricoperto di una
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