Volumen II - SAM

obtienen ángulos de contacto cercanos a 0º (0-30º), las superficies hidrofóbicas presentan ángulos cercnos a
90º. Los ángulos de contacto del PE encontrados en la bibliografía son variables 66º [10], 90º [11], 95º [12].
En nuestro estudio, los ángulos de contacto para la película de PE tratada con las bacteriocinas producidas
por L. curvatus CRL705 (83º ± 3º) y sin tratar (81º ± 2º) no presentaron diferencias significativas entre ellos;
es decir que el tratamiento de activación no cambió el carácter hidrofóbico de la superficie. Estos datos
explicarían el hecho de que la activación con bacteriocinas no afecte la fuerza de sellado del material
polimérico, lo cual resulta ventajoso para la aplicación del material activo en envases para alimentos.
3.4-Migración de lactocina 705 y lactocina AL705
Se ha propuesto que la migración de una sustancia desde un material plástico a un simulante alcanza el
equilibrio y por lo tanto la cantidad de analito que migró es máxima luego de los 10 días de ensayo [4]. En
nuestro caso, como reaseguro experimental, extendimos ese período a 15 días obteniéndose los resultados
graficados en la figura 2. Como se observa, existe una leve disminución en la actividad de la película frente a
L. plantarum CRL691 y L. innocua 7 pero la misma es menor al 20 % al cabo de 15 días. En ninguno de los
casos se detectó actividad en el simulante acuoso. Es importante notar que la presencia de actividad
antimicrobiana en la película aún después de haber estado en contacto con agua, sugiere la posible existencia
de interacciones de tipo hidrofóbico entre ambas bacteriocinas y la superficie de PE. Existen evidencias de la
adsorción de moléculas proteicas a superficies hidrofóbicas e hidrofílicas, Roach y col. encontraron mayor
fuerza en la interacción de proteínas con superficies hidrofóbicas que hidrofílicas [8]. Resultados similares
fueron reportados por Daeschel y col. cuando estudiaron la afinidad de nisina por superficies de diferente
hidrofobicidad [13]. En el caso particular de las bacteriocinas de clase II se determinó que forman hélices
anfifílicas de hidrofobicidad variable [14] y en nuestro grupo de trabajo, utilizando un modelo de
membranas, se encontró que se produce interacción entre el componente lacβ de lactocina 705 y la parte
hidrofóbica (interna) de la membrana.[15]. En el presente trabajo la superficie del PE presenta ángulos de
contacto cercanos a 90 ºC, lo que permitiría postular algún grado de participación de interacciones de tipo
hidrofóbico entre las bacteriocinas y la superficie de la película de PE.
Figura 2 Actividad antimicrobiana frente a (■) L .plantarum CRL691 y (■)L.innocua 7 de las películas
luego del ensayo de migración. Actividad antimicrobiana en el simulante acuoso (◊).
3.5-Adsorción de lactocina 705 sintética en la superficie de PE. Estudios cinéticos y de equilibrio.
Para entender la interacción entre la película de PE y las bacteriocinas se estudiaron las cinéticas de
adsorción-descomposición de lactocina 705 sintética. En la figura 3 se observa que el equilibrio de adsorción
a 30ºC se alcanza tras una hora de contacto. La concentración óptima para trabajar en estas condiciones
(menor concentración con la que se obtiene una película con actividad uniforme en agar) es 1 ppm, (figura
4). A los efectos de optimizar la temperatura del proceso de adsorción, se pusieron en contacto películas de
PE a 20, 30 y 40ºC durante diferentes tiempos con la solución de lactocina 705 de 1ppm. En paralelo se
realizaron ensayos de degradación térmica, en las mismas condiciones, en ausencia de PE. Como se observa
en la figura 5, la degradación térmica y la adsorción aumentan con la temperatura siendo la solución de
compromiso trabajar a 30ºC (figura 5c). Temperaturas menores si bien disminuyen la degradación,
obligarían a utilizar soluciones más concentradas para obtener impregnación activa, ya que no es posible
obtenerla utilizando tiempos mayores. Por otra parte a temperaturas mayores si bien sería posible disminuir
el tiempo, aumentaría notablemente la degradación térmica, lo cual requeriría concentraciones mayores de
bacteriocina para obtener una película de PE activa (figura 5c). En la figura 6 se representa la isoterma de
adsorción de lactocina 705 sobre una película de PE. La misma presenta un comportamiento que responde a
una ecuación tipo Langmuir. Un comportamiento similar fue reportado para la adsorción de albúmina de
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