VOLUMEN I

ERGOCALCIFEROL
HO
H
H 3 C H H
CH CH3
3
H
CH 3
H
CH 2
CH 3
C 28 H 44 O PM: 396,7 50-14-6
Sinonimias - Calciferol. Vitamina D 2 .
Definición - Ergocalciferol es (3,5Z,7E, 22E)-
9,10-Secoergosta-5,7,10(19),22-tetraen-3-ol. Debe
contener no menos de 97,0 por ciento y no más de
103,0 por ciento de C 28 H 44 O y debe cumplir con las
siguientes especificaciones.
Caracteres generales - Cristales blancos,
inodoros. Se altera por exposición a la luz, al aire y
al calor. Soluble en alcohol, cloroformo, éter y en
aceites grasos; insoluble en agua.
Sustancias de referencia -
Ergocalciferol SR-FA. Vitamina D para Aptitud
del Sistema de Valoración SR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases inactínicos herméticos, bajo
nitrógeno y en un sitio fresco.
ENSAYOS
Identificación
A - Absorción infrarroja . En fase sólida.
Registrar el espectro entre 2 y 12 µm.
B - Absorción ultravioleta
Solvente: alcohol.
Concentración: 10 µg por ml.
Las absortividades a 265 nm, calculada
sobre la sustancia seca, no deben diferir en más de
3,0 %.
C - Disolver aproximadamente 0,5 mg de
Ergocalciferol en 5 ml de cloroformo, agregar
0,3 ml de anhídrido acético y 0,1 ml de ácido
sulfúrico y agitar vigorosamente: se debe producir
un color rojo brillante que rápidamente se torna
violeta y luego cambia de azul a verde.
Determinación del punto de fusión
Método I. Colocar la muestra en un envase
cerrado y enfriarla a 10 ºC o a una temperatura
inferior, durante no menos de 2 horas. Sin
pulverización previa, cargar el material enfriado en
un tubo capilar, luego colocar de inmediato el tubo
capilar cargado en un desecador al vacío y secar a
una presión que no exceda los 20 mm Hg durante
3 horas. Inmediatamente después de retirar el
desecador, sellar a la llama el extremo abierto del
tubo y proceder lo antes posible con la
determinación del punto de fusión del siguiente
modo: calentar el baño hasta alcanzar una
temperatura de 10 ± 1 ºC por debajo del punto de
fusión esperado, luego introducir el tubo cargado y
calentar a una velocidad de ascenso de 3,0 ± 0,5 ºC
por minuto hasta completar la fusión. Si el tamaño
de partícula del material es demasiado grande para
el capilar, enfriar previamente la muestra como se
indicó anteriormente. Luego, aplicando la menor
presión posible, romper cuidadosamente las
partículas a un tamaño apropiado para que entren en
el capilar. Debe fundir entre 115 y 119 °C.
Determinación de la rotación óptica
Rotación específica: Entre +103° y +106°.
Solución muestra: 15 mg por ml, en alcohol.
[NOTA: preparar la solución rápidamente,
empleando Ergocalciferol de un envase que lleve
abierto no más de 30 minutos y proceder a la
determinación dentro de los 30 minutos posteriores
a la preparación de la solución.]
Sustancias reductoras
A 10 ml de una solución de Ergosterol en
alcohol absoluto 1 en 100, agregar 0,5 ml de una
solución de azul de tetrazolio (SR). Luego agregar
0,5 ml de una solución de hidróxido de
tetrametilamonio (SR) en alcohol absoluto 1 en 10.
Dejar reposar la mezcla durante exactamente
5 minutos y luego agregar 1 ml de ácido acético
glacial. Preparar un blanco tratando 10 ml de
alcohol absoluto del mismo modo. Determinar la
absorbancia de la solución a 525 nm, con un
espectrofotómetro apropiado, contra el blanco: la
absorbancia no debe ser mayor que la obtenida a
partir de una solución de aproximadamente 0,2 µg
por ml de hidroquinona en alcohol absoluto, tratado
de forma similar.
Impurezas orgánicas volátiles
Método III.
Solvente: dimetilsulfóxido.
VALORACIÓN
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de
25 cm × 4,6 mm con fase estacionaria constituida
por partículas porosas de sílice de 5 a 10 µm de