VOLUMEN I

HO
ESTRIOL
H
H
OH
CH 3 H
H
H
OH
C 18 H 24 O 3 PM: 288,4 50-27-1
Definición - Estriol es (16,17)-
Estra-1,3,5(10)-trieno-3,16,17-triol. Debe contener
no menos de 97,0 por ciento y no más de 103,0 por
ciento de C 18 H 24 O 3 , calculado sobre la sustancia
seca y debe cumplir con las siguientes
especificaciones.
Caracteres generales - Polvo cristalino blanco
o casi blanco. Funde aproximadamente a 280 ºC.
Soluble en acetona, cloroformo, dioxano, éter y
aceites vegetales; moderadamente soluble en
alcohol; insoluble en agua.
Sustancia de referencia -EstriolSR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases inactínicos de cierre perfecto.
ENSAYOS
Identificación
A - Absorción infrarroja . En fase sólida.
B - Absorción ultravioleta
Solvente: alcohol.
Concentración: 100 µg por ml.
Disolución completa
Disolver 250 mg de Estriol en 5 ml de piridina:
la solución debe ser transparente y exenta de sólidos
no disueltos.
Determinación de la rotación óptica
Rotación específica: Entre +54º y +62°.
Solución muestra: 4 mg por ml, en dioxano.
Pérdida por secado
Secar a 105 ºC durante 3 horas: no debe perder
más de 0,5 % de su peso.
Determinación del residuo de ignición
No más de 0,1 %.
Pureza cromatográfica
Fase estacionaria - Emplear una placa para
cromatografía en capa delgada (ver 100.
Cromatografía) recubierta con gel de sílice para
cromatografía, de 0,25 mm de espesor.
Fase móvil - Cloroformo, metanol, acetona y
ácido acético (90:5:5:5). [NOTA: preparar
inmediatamente antes de su uso.]
Diluyente - Dioxano y agua (9:1).
Solución muestra - Preparar una solución de
Estriol en Diluyente de aproximadamente 20,0 mg
por ml.
Solución madre del estándar - Preparar una
solución de Estriol SR-FA en Diluyente de
aproximadamente 20,0 mg por ml.
Soluciones estándar - Preparar una serie de
diluciones de la Solución madre del estándar en
Diluyente para obtener las siguientes soluciones:
Soluciones Concentración % con respecto
estándar (mg por ml) a la muestra
A 0,40 2,0
B 0,20 1,0
C 0,10 0,5
D 0,05 0,25
Cámara cromatográfica - Revestir una cámara
(ver 100. Cromatografía) con papel absorbente y
verter en la cámara 200 ml de Fase móvil.
Equilibrar la cámara durante 15 minutos antes de su
uso.
Revelador - Metanol y ácido sulfúrico (7:3).
Procedimiento - Aplicar por separado sobre la
placa 5 µl de la Solución muestra, 5 µl de Solución
madre del estándar y 5 µl de Soluciones estándar
A, B, C y D. Dejar secar las aplicaciones y
desarrollar los cromatogramas hasta que el frente
del solvente haya recorrido aproximadamente tres
cuartas partes de la longitud de la placa. Retirar la
placa de la cámara, marcar el frente del solvente y
dejar secar al aire. Pulverizar sobre la placa con
Revelador y calentar a 100 ºC durante 15 minutos.
El valor de R f de la mancha principal en el
cromatograma obtenido a partir de la Solución
muestra debe ser similar al obtenido con la Solución
madre del estándar. Si en el cromatograma de la
Solución muestra se observan manchas secundarias
a la mancha principal, estimar la concentración de
cada una por comparación con las manchas
obtenidas en los cromatogramas de las Soluciones
estándar A, B, C y D. La suma de las impurezas en
la Solución muestra no debe ser mayor de 2,0 %.
VALORACIÓN
Preparación muestra - Pesar exactamente
alrededor de 50 mg de Estriol, disolver en alcohol,
diluir hasta 100,0 ml y mezclar. Diluir 10,0 ml de
esta solución con alcohol a 100,0 ml.