VOLUMEN I

pH 6,0 con ácido cítrico 0,1 M o fosfato dibásico de
sodio 0,2 M.
Fase móvil - Solución reguladora de pH 6,0 y
acetonitrilo (90:10). Filtrar y desgasificar. Hacer
los ajustes necesarios (ver Aptitud del sistema en
100. Cromatografía).
Preparación estándar - Disolver una cantidad
exactamente pesada de Metotrexato SR-FA en Fase
móvil para obtener una solución de aproximadamente
100 µg por ml.
Preparación muestra - Pesar exactamente alrededor
de 25 mg de Metotrexato, transferir a un
matraz aforado de 250 ml, disolver en Fase móvil,
completar a volumen con el mismo solvente y mezclar.
Solución de aptitud del sistema - Disolver cantidades
apropiadas de Metotrexato SR-FA y Ácido
Fólico en Fase móvil para obtener una solución de
aproximadamente 0,1 mg por ml de cada una.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) -
Cromatografiar la Solución de aptitud del sistema y
registrar las respuestas de los picos según se indica
en Procedimiento: los tiempos de retención relativos
deben ser aproximadamente 0,35 para ácido
fólico y 1,0 para metotrexato; la resolución R entre
los picos de ácido fólico y metotrexato no debe ser
menor de 8,0; la desviación estándar relativa para
inyecciones repetidas no debe ser mayor de 2,5 %.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
10 µl) de la Preparación muestra y la Preparación
estándar, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de los picos principales. Calcular la
cantidad de C 20 H 22 N 8 O 5 en la porción de Metotrexato
en ensayo.