VOLUMEN I

OH
H 3C
H3C
ANFOTERICINA B
O
CH3
OH
OH
OH
OH
OH
OH
O
O
OH
H
NH 2
OH
O
H 3C
O OH
C 47 H 73 NO 17 PM: 924,1 1397-89-3
Sinonimia - Amfotericina B
Definición – Anfotericina B es el Ácido [1R-
(1R*,3S*,5R*,6R*,9R*,11R*,15S*,16R*,17R*,18S*
,19E,21E,23E,25E,27E,29E,31E,33R*,35S*,36R*,
37S*)]-33-[(3-amino-3,6-dideoxi--D-manopirano-
sil)oxi]-1,3,5,6,9,11,17,37-octahidroxi-15,16,18-
trimetil-13-oxo-14,39-dioxabiciclo[33.3.1] nonatriaconta-19,21,23,25,27,29,31-heptaeno-36-carboxílico.
Debe tener una potencia de no menos de
750 µg de C 47 H 73 NO 17 por mg, calculada sobre la
sustancia seca y debe cumplir con las siguientes
especificaciones.
Caracteres generales - Polvo amarillo a anaranjado;
inodoro o prácticamente inodoro. Soluble
en dimetilformamida, dimetilsulfóxido; poco soluble
en metanol; insoluble en agua, alcohol absoluto,
éter, tolueno y propilenglicol.
Sustancias de referencia - Anfotericina
B SR-FA. Nistatina SR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases inactínicos de cierre perfecto, en un
sitio frío.
ENSAYOS
Identificación
Absorción ultravioleta
Intervalo espectral 1: 240 a 320 nm.
Solución 1: Preparar según se indica para Solución
muestra en Límite de anfotericina A.
El espectro de absorción ultravioleta de la Solución
1 debe presentar máximos a las mismas longitudes
de onda que el de la Solución estándar de
Anfotericina B empleada en Límite de anfotericina
A, excepto una banda extra que puede aparecer
aproximadamente a 304 nm en el espectro de esta
solución.
Intervalo espectral 2: 320 a 400 nm.
Solución 2: Preparar según se indica para Solución
muestra en Límite de anfotericina A y diluir
con 9 volúmenes de metanol.
El espectro de absorción ultravioleta de la Solución
2 debe presentar máximos a las mismas longi-
OH
tudes de onda que el de la Solución estándar de
Anfotericina B empleada en Límite de anfotericina
A.
Pérdida por secado
Pesar exactamente alrededor 100 mg de Anfotericina
B, secar al vacío en un pesafiltro provisto de
una tapa con perforación capilar, a una presión no
mayor de 5 mm Hg, a 60 °C durante 3 horas: no
debe perder más de 5,0 % de su peso.
Determinación del residuo de ignición
No más de 0,5 %; el residuo carbonizado se debe
humedecer con 2 ml de ácido nítrico y 5 gotas de
ácido sulfúrico. [NOTA: la Anfotericina B destinada
a la preparación de cremas dermatológicas, lociones,
ungüentos, suspensiones orales y cápsulas,
debe proporcionar un residuo no mayor de 3,0 %].
Límite de anfotericina A
Solución estándar de nistatina - Pesar exactamente
alrededor de 20 mg de Nistatina SR-FA,
transferir a un matraz aforado de 200 ml. Disolver
en 40,0 ml de dimetilsulfóxido, completar a volumen
con metanol y mezclar. Transferir 4,0 ml de
esta solución a un matraz aforado de 50 ml, completar
a volumen con metanol y mezclar.
Solución estándar de Anfotericina B - Pesar
exactamente alrededor de 50 mg de Anfotericina
B SR-FA y transferir a un matraz aforado de
50 ml. Disolver en 10,0 ml de dimetilsulfóxido,
completar a volumen con metanol y mezclar.
Transferir 4,0 ml de esta solución a un matraz aforado
de 50 ml, completar a volumen con metanol y
mezclar. [NOTA: preparar esta solución en el día
de su uso].
Solución muestra - Pesar exactamente alrededor
de 50 mg de Anfotericina B y transferir a un matraz
aforado de 50 ml. Disolver en 10,0 ml de dimetilsulfóxido,
completar a volumen con metanol y
mezclar. Transferir 4,0 ml de esta solución a un
matraz aforado de 50 ml, completar a volumen con
metanol y mezclar.
Procedimiento - Determinar concomitantemente
las absorbancias de la Solución estándar de nistatina,
la Solución estándar de Anfotericina B y la
Solución muestra en celdas de 1 cm, a 304 y
282 nm, con un espectrofotómetro apropiado, empleando
una solución 1 en 62,5 de dimetilsulfóxido
en metanol como blanco. Calcular el porcentaje de
anfotericina A en ensayo, por la fórmula siguiente:
A
A
A
A
N B 282 M 304
B304
M 282
A
A
A
A P
25P
B
282
N
304
B 304
M
en la cual P N es el peso en mg de Nistatina SR-FA
empleada para preparar la Solución estándar de
nistatina, A B282 y A B304 son las absorbancias de la
N
282