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VOLUMEN I

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que presenta cantidades importantes de azúcares<br />

reductores. Contiene carbohidratos fermentables y<br />

da positivo el ensayo para indol, acetilmetilcarbinol<br />

y sulfuro con inoculación e incubación con los<br />

microorganismos especificados.<br />

Compuestos nitrogenados (Ensayo para reactivos)<br />

Determinar por el método Kjeldahl, empleando<br />

una muestra previamente secada a 105 °C hasta<br />

peso constante. Contiene no menos de 8,5 %.<br />

(peptona<br />

bacteriológica) - Polvo color pardo, de olor característico<br />

pero no pútrido. Soluble en agua; insoluble<br />

en alcohol y éter. Una solución (2 en 100) esterilizada<br />

en autoclave es transparente y posee reacción<br />

neutra o casi neutra.<br />

Grado de digestión - Disolver 1 g en 10 ml de<br />

agua y emplear esta solución para los siguientes<br />

ensayos:<br />

(a) Cubrir 1 ml de la solución digerida con<br />

0,5 ml de una solución de 1 ml de ácido<br />

acético glacial en 10 ml de alcohol diluido:<br />

no se forma ningún anillo precipitado en la<br />

unión de los dos líquidos y al agitar no se<br />

produce turbidez (indicando la ausencia de<br />

proteína no digerida).<br />

(b) Mezclar 1 ml de la solución digerida con<br />

4 ml de sulfato de cinc saturado: se forma<br />

una cantidad pequeña de precipitado (indicando<br />

la presencia de proteosas). Filtrar y<br />

retener el filtrado.<br />

(c) A 1 ml del filtrado anterior agregar 1 gota<br />

de bromo (SR): el cambio de color amarillo<br />

claro a rojo pardo indica la presencia de<br />

triptofano.<br />

Compuestos nitrogenados, Pérdida por secado,<br />

Residuo de ignición y Nitrito - Proceder según se<br />

indica en Digerido pancreático de caseína.<br />

Contenido microbiano - Disolver 1 g en 10 ml<br />

de agua. Difundir 0,01 ml en 1 cm 2 de un portaobjetos<br />

de vidrio. Teñir por el método de Gram y examinar<br />

con una lente de inmersión en aceite: no más<br />

de 50 microorganismos o agregados, son visibles en<br />

10 campos consecutivos.<br />

Ensayo bacteriológico - Cumple los siguientes<br />

ensayos para propiedades de nutriente bacteriano.<br />

Preparar medios de las siguientes composiciones:<br />

(a) 2 % de digerido y rojo de fenol (SR) suficiente<br />

para dar un color perceptible en agua;<br />

(b) 0,1 % de digerido en agua;<br />

(c) 0,1 % de digerido y 0,5 % de dextrosa en<br />

agua;<br />

(d) 1 % de digerido en agua.<br />

Ajustar todos los medios a pH de 7,2 a 7,4.<br />

Transferir 5 ml de (a) a tubos de fermentación de<br />

Durham y 5 ml de (b), (c) y (d) a tubos de ensayo.<br />

Esterilizar en autoclave a 121 °C durante 15 minutos.<br />

Luego de 24 horas en reposo todos los medios<br />

permanecen transparentes.<br />

Presencia de carbohidratos fermentables -<br />

Inocular medio (a) con Escherichia coli y con<br />

Streptococcus liquefaciens: el ácido es producido<br />

por E. coli pero no por S. liquefaciens luego<br />

de incubar durante 24 horas.<br />

Producción de indol - Inocular medio (b) con<br />

Escherichia coli y con Aerobacter aerogenes e<br />

incubar durante 24 horas. Agregar aproximadamente<br />

0,5 ml de p-dimetilaminobenzaldehído<br />

(SR): la aparición de un color rosado o rojo<br />

(soluble en cloroformo) indica la producción de<br />

indol por E. coli. El cultivo de A. aerogenes da<br />

resultado negativo.<br />

Producción de acetilmetilcarbinol - Inocular<br />

medio (c) con Escherichia coli y con Aerobacter<br />

aerogenes e incubar durante 24 horas. Agregar<br />

al cultivo un volumen igual de solución de<br />

hidróxido de sodio (1 en 10), agitar y dejar reposar<br />

a temperatura ambiente durante varias horas:<br />

la aparición de un color rosado indica la producción<br />

de acetilmeticarbinol por A. aerogenes. El<br />

cultivo de E. coli da resultado negativo.<br />

Producción de sulfuro de hidrógeno - Inocular<br />

medio (d) con Salmonella typhosa. Colocar<br />

una tira de papel de acetato de plomo entre el<br />

tapón de algodón y la boca del tubo de ensayo<br />

para que cuelgue aproximadamente 5 cm encima<br />

del medio. Luego incubar durante 24 horas: la<br />

parte inferior del papel de acetato de plomo<br />

presenta un ennegrecimiento apreciable (indica<br />

la formación de sulfuro de plomo).<br />

- C 56 H 92 O 29 - (PM: 1.229,3) -<br />

Polvo blanco, cristalino. Practicamente insoluble<br />

en agua; soluble en alcohol caliente, ácido acético<br />

glacial y ácido acético al 75 %; insoluble en<br />

cloroformo y éter. Funde aproximadamente a<br />

230 °C, con descomposición.<br />

Rotación específica - Entre 47° y<br />

49°, determinado en una solución de ácido<br />

acético al 75 % conteniendo 100 mg por ml.<br />

Solubilidad en alcohol - Una solución de<br />

500 mg en 20 ml de alcohol caliente es incolora<br />

y completa.<br />

Pérdida por secado - Secar a 105 °C<br />

hasta peso constante: no pierde más de 6 % de<br />

su peso.<br />

Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) -<br />

No más de 0,3 %.<br />

- C 23 H 34 O 5 - (PM: 390,5) -<br />

Emplear un reactivo analítico apropiado.<br />

- C 15 H 14 N 2 O<br />

- (PM: 238,3) - Cristales blancos.

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