VOLUMEN I

LEUCOVORINA CÁLCICA
H 2 N
N
H
N
O
H
N
N
CHO
H
N
O
H
N
H
O
O
Ca
C 20 H 21 CaN 7 O 7 PM: 511,5 1492-18-8
Sinonimia - Folinato Cálcico.
Definición - Folinato Cálcico es N-[p-[[[(6RS)-
2-Amino-5-formil-5,6,7,8-tetrahidro-4-hidroxi-6-
pteridinil-]metil]amino]benzoil]-L-glutamato de
calcio. Debe contener no menos de 95,0 por ciento
y no más de 105,0 por ciento de C 20 H 21 CaN 7 O 7 ,
calculado sobre la sustancia anhidra y debe cumplir
con las siguientes especificaciones.
Caracteres generales - Polvo amarillo o blanco
amarillento. Muy soluble en agua; prácticamente
insoluble en alcohol.
Sustancia de referencia - Folinato Cálcico
SR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases inactínicos bien cerrados.
ENSAYOS
Identificación
A - Absorción infrarroja . En fase sólida.
[NOTA: no secar la muestra].
B - Examinar los cromatogramas obtenidos en
Valoración. El tiempo de retención del pico principal
en el cromatograma obtenido a partir de la Preparación
muestra se debe corresponder con el obtenido
con la Preparación estándar.
Determinación de agua
Titulación volumétrica directa. No más de
17,0 %.
Límite de metales pesados
Método II. No más de 0,005 %.
VALORACIÓN
[NOTA 1: realizar este ensayo sin interrupciones,
empleando agua recientemente desionizada
cada vez que se indique agua y material de vidrio
inactínico para todas las soluciones que contengan
Folinato Cálcico,].
Sistema cromatográfico - Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de
30 cm 4,0 mm con fase estacionaria constituida
O
O
por octadecilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 5 a 10 m de diámetro. El
caudal debe ser aproximadamente entre 1 y 2 ml
por minuto.
Solución de hidróxido de tetrabutilamonio - Disolver
una porción de hidróxido de tetrabutilamonio
en metanol para obtener una solución de aproximadamente
0,25 g por ml.
Solución de fosfato monobásico de sodio 2 N -
Disolver una porción de fosfato monobásico de
sodio monohidrato en agua para obtener una solución
de aproximadamente 276 mg por ml.
Fase móvil - Mezclar 15 ml de Solución de
hidróxido de tetrabutilamonio con 835 ml de agua.
Agregar 125 ml de acetonitrilo y ajustar a un pH
aparente de 7,5 0,1 con Solución de fosfato monobásico
de sodio 2 N. Mezclar, diluir a 1 litro con
agua y filtrar. Hacer los ajustes necesarios (ver
Aptitud del sistema en 100. Cromatografía).
Diluyente - Mezclar 15 ml de Solución de
hidróxido de tetrabutilamonio con 900 ml de agua y
ajustar a pH 7,5 0,1 con Solución de fosfato monobásico
de sodio 2 N. Diluir a 1 litro con agua y
mezclar.
Preparación estándar - Disolver una cantidad
exactamente pesada de Folinato Cálcico SR-FA en
Diluyente para obtener una solución de aproximadamente
175 µg de Folinato Cálcico anhidra por ml.
Preparación muestra - Pesar exactamente alrededor
de 20 mg de Folinato Cálcico, transferir a un
matraz aforado de 100 ml, disolver, completar a
volumen con Diluyente y mezclar.
Solución de aptitud del sistema - Disolver una
porción de Ácido Fólico en Diluyente para obtener
una solución de aproximadamente 175 µg por ml.
Mezclar 1 volumen de esta solución con
4 volúmenes de la Preparación estándar.
Aptitud del sistema (ver 100. Cromatografía) -
Cromatografiar la Solución de aptitud del sistema y
registrar las respuestas de los picos según se indica
en Procedimiento: la resolución R entre los picos de
Folinato Cálcico y ácido fólico no debe ser menor
de 3,6; los tiempos de retención relativos deben ser
aproximadamente 1,0 para Folinato Cálcico y 1,6
para ácido fólico; la desviación estándar relativa
para inyecciones repetidas no debe ser mayor de
2,0 %.
Procedimiento - Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
15 l) de la Preparación estándar y la Preparación
muestra, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de los picos principales. Calcular la
cantidad de C 20 H 21 CaN 7 O 7 en la porción de Folinato
Cálcico en ensayo.