VOLUMEN I

a
- El Factor X a es la enzima proteolítica
obtenida a partir del plasma bovino, que
escinde a la protrombina para formar trombina. Es
una glicoproteína que tiene un peso molecular de
40.000. Por electroforesis en gel (ver 300. Electroforesis)
la proteína principal de interés constituye
no menos de 90 % de la cantidad total de zonas
proteicas. Para emplear como un reactivo en el
ensayo de Antifactor X a , la enzima es activada por
el veneno de serpiente de Russel, se retira el agente
activante mediante cromatografía, la preparación se
estabiliza con albúmina bovina y se liofiliza.
Actividad específica - No menos de 40 UI de
Factor X a por mg de proteína, cuando se ensaya del
siguiente modo: mezclar 0,1 ml de una solución
saturada de cefalina derivada de tromboplastina
cerebral de conejos, equivalente a la tromboplastina
de aproximadamente 20 mg de polvo de cerebroacetona
de conejo por ml, en plasma bovino y
0,1 ml de cloruro de calcio 0,025 M; agregar de
inmediato 0,1 ml de la solución de Factor X a , correspondiente
a una concentración de 0,01 mg de
proteína específica por ml, e incubar a 37 °C: produce
un coágulo en 15 segundos.
Ausencia de trombina - Una solución que contenga
3,0 UI de Factor X a por ml en Solución reguladora
de pH 8,4 (ver Heparina Sódica) se incuba a
20 ºC en ausencia de iones calcio: no se produce
exceso de coagulación del fibrinógeno puro dentro
de un periodo de 24 horas.
- Emplear uno de grado apropiado.
- (Ortofenantrolina) -
(PM: 198,2) - C 12 H 8 N 2 . H 2 O - Emplear un reactivo
analítico apropiado.
-
C 12 H 9 ClN 2 . H 2 O - (PM: 234,7) - Polvo cristalino
blanco o casi blanco. Fácilmente soluble en agua;
soluble en alcohol.
Punto de fusión- Aprox. 215 °C, con descomposición.
- (Antipirina; 2,3-dimetil-1-fenil-3-
pirazolin-5-ona) - C 11 H 12 N 2 O - (PM: 188,2) -
Polvo cristalino incoloro.
Punto de fusión- Aprox. 112 °C.
dl - C 9 H 11 NO 2 - (PM: 165,2) -
Emplear uno de grado apropiado.
- (m-Fenilfenol) - C 6 H 5 C 6 H 4 OH -
(PM: 170,2) - Polvo cristalino blanco o casi blanco.
Valoración - Inyectar una alícuota apropiada en
un cromatógrafo de gases (ver 100. Cromatografía)
equipado con un detector de ionización a la llama y
una columna capilar de 30 m × 0,25 mm recubierta
por una fase estacionaria constituida por aceite de
dimetilpolisiloxano. Mantener el inyector y el detector
a aproximadamente 250 y 310 ºC, respectivamente.
La temperatura de la columna se mantiene
a 150 °C y se programa un ascenso de 15 °C por
minuto hasta 250 °C. Se emplea helio como gas
transportador. El área del pico de 3-fenilfenol no es
menor de 98 % del área total.
Intervalo de fusión - Entre 76 y 79 °C.
- C 6 H 5 NCO - (PM: 119,1) -
Líquido transparente, incoloro o amarillo pálido de
volatilidad media.
Precaución - El Fenil isocianato es un violento
lacrimatorio y el vapor es altamente tóxico. Manipular
con cuidado.
Valoración - Transferir 250 mg, exactamente
pesados, a un erlenmeyer de 250 ml con tapón de
vidrio. Tomar precauciones para evitar pérdidas por
volatilización y evitar la respiración del vapor.
Agregar 20 ml de solución de butilamina (25 g de
butilamina, previamente secados sobre pellets de
hidróxido de potasio, diluidos a 1 litro con dioxano),
insertar el tapón en el erlenmeyer y dejar reposar
durante 15 minutos. Agregar unas pocas gotas
de rojo de metilo (SR) y 25 ml de agua y titular el
exceso de amina con ácido sulfúrico 0,1 N (SV).
Realizar una determinación con un blanco empleando
20 ml de la solución de butilamina (ver Titulaciones
residuales en 780. Volumetría). Restar el
volumen de ácido sulfúrico 0,1 N consumido en la
titulación de la muestra de aquél consumido en la
titulación del blanco. Cada mililitro de ácido sulfúrico
0,1 N, representando por esta diferencia, equivale
a 11,91 mg de C 6 H 5 NCO. Contiene no menos
de 97,0 % de C 6 H 5 NCO.
- C 6 H 5 NHNH 2 - (PM: 108,1) -
Líquido incoloro o ligeramente amarillento, altamente
refractivo. [NOTA: proteger de la luz y destilar
bajo presión reducida antes de emplear.]
Temperatura de solidificación - No menor
de 16 °C.
Materia insoluble - Agitar 1 ml con 20 ml de
ácido acético diluido: la solución resultante es
transparente o casi transparente.
Residuo de ignición (Ensayo para reactivos) -
Someter a ignición 1 ml con 0,5 ml de ácido sulfúrico:
el residuo pesa no más de 1 mg (0,1 %).